Пузыреплодник цветок фото: Пузыреплодник сорта фото и описание — Сад и огород

Posted on 26.12.1974 by

alexxlab Опубликовано в Разное — Нет комментариев ↓

Пузыреплодник калинолистный. Посадка, размножение, уход, сорта, фото на Supersadovnik.ru

Семейство

Розоцветные (Rosaceae)

Декоративные и хозяйственные качества

декоративноцветущий, декоративнолистный

Почва

бедные, плодородная, средней плодородности, дренированная, кислая, нейтральная, песчаная, суглинистая

Влажность почвы

умеренно-влажно, сухо

Продолжительность жизни

многолетник

Освещённость

прямые солнечные лучи, полутень, рассеяные солнечные лучи

Размножение

черенками, семенами, делением

Раздел

сад

Нетрудно догадаться, что название пузыреплодника, как русское, так и латинское Physocarpus (physo – пузырь и carpos – плод), произошло от особой формы плодов. Каждый из них напоминает надутый тюльпанчик в миниатюре. Сначала зеленые, позже красные, а при созревании (в сентябре-октябре) коричневато-бурые, они эффектно контрастируют с листвой не только желтых и зеленых сортов растения, но и пурпурных, отличаясь от нее оттенком. Однако хороши у пузыреплодника не только листья и плоды, но и, разумеется, кремово-белые с красноватыми тычинками мелкие цветки, собранные в соцветия, появляющиеся в июне на концах побегов предыдущего года. Из-за их схожести с цветками

спиреи у растения есть и другое название – спирея калинолистная. Цветение длится 2–3 недели. Особенно красивы розовато-белые цветки сортов с пурпурной окраской листьев.

Цветки, как источник нектара, привлекают многих насекомых: пчел, ос, мух и бабочек. Плоды служат кормом некоторым птицам.

Пузыреплодник – крупный (3–4 м – высота и диаметр) кустарник с густой кроной. Побеги растут сначала вертикально вверх, затем изгибаются живописными дугами. Молодые ветви гладкие, темно-зеленые с красноватым оттенком, с возрастом кора приобретает темно-коричневый цвет и расслаивается полосами, образуя слои от красноватых до светло-коричневых.

На протяжении жизни растения она непрерывно линяет тонкими полосками (отсюда английское название растения Ninebark – «девятикорый»). Подобно кошке, которая, согласно поверью, имеет девять жизней, кора пузыреплодника постоянно обновляется. И делает растение привлекательным не только летом, но и зимой.

Пузыреплодник калинолистный: посадка и уход

Пузыреплодник калинолистный (Physocarpus opulifolius) – листопадный кустарник родом из Северной Америки. Название растение получило за сходство плодов с маленькими шариками – пузырьками. Если нажать на листовку осенью, когда она созрела, раздается легкий хлопок.

Декоративный кустарник

Крона пузыреплодника калинолистного шаровидной формы. Раскидистые ветви слегка поникают, образуя плотную завесу. Кора бурого или коричневого цвета.

Высота растения составляет 1,5-3 м, что зависит от сорта.

Зеленые резные листья формой напоминают калиновые. У культурных сортов бывают также золотистые, красные и даже темно-пурпурные.

В конце июня растение покрывается розоватой или белой дымкой. Это распускаются мелкие цветочки, собранные в щитки размером до семи сантиметров.

Плоды пузыреплодника — листовки, издающие забавный звук. Как хлопок маленького салюта. Зеленый цвет молодых плодов к осени становится красноватым, а позже коричневым. Нарядные гроздья украшают куст долгую зиму.

Пузыреплодник калинолистный неприхотлив и переносит даже сильную загазованность. Жизнь кустарника долгая — украшать ваш сад он будет почти 30 лет.

Обстоятельства времени и места

Посадив пузыреплодник калинолистный весной, вы не ошибетесь. Молодое растение хорошо приживется и окрепнет к зиме. Посадка осенью возможна в сентябре.

Купив в садовом центре саженец в горшочке, можете высадить его в любое время, с весны до осени. Хотя все же лучше с посадкой не затягивать, чтобы корни не переросли. Поставьте растение в полутень и регулярно поливайте. Ком земли должен быть влажным.

Пузыреплодник — растение очень выносливое. Растет на солнце и в тени, на сухих и влажных местах. Конечно, не стоит сажать его на затопляемых участках.

Предпочитает кислые почвы, поэтому не удобряйте его известью. Даже на бедных почвах он станет украшением участка.

Зеленые сорта выносят тень. Сортам же с золотистыми, красными и пурпурными листьями отведите солнечный участок. Иначе в тени их листья позеленеют и потеряют декоративность.

Важно правильно посадить

Размер ямы для посадки пузыреплодника калинолистного должен позволять корням расположиться в ней свободно. Глубина не менее полуметра. Важно сделать дренаж, чтобы вода не застаивалась у корней. Для этого на дно ямы кладут некрупный щебень слоем 20 см.

Землю для посадки лучше взять плодородную, смешав с песком и торфом в соотношении 2 : 1 : 1. Удобрения не нужны.

Если саженец в горшочке — сохраните ком земли. Кустик с открытыми корнями установите в яму на холмик из почвы и расправьте корни.

Растение посадите с таким расчетом, чтобы корневая шейка не оказалась засыпана. Слоями добавляйте землю, время от времени поливая, чтобы уплотнить.

Посадив, еще раз обильно полейте. Приствольный круг замульчируйте слоем 10-15 см. Для этого сгодится торф, щепа, мелкая декоративная галька, просто сухая земля. Мульча поможет держать почву влажной, пока кустик приживается.

Высаживайте пузыреплодник на расстоянии 1,5-2 м от других растений.

Теперь выращиваем

Головная боль всех любителей декоративных культур, к коим относится и пузыреплодник калинолистный, — посадка и уход. Сразу успокоим: рассматриваемое нами растение неприхотливо, хотя определенные условия ему создать, разумеется, нужно.

Недавно посаженные кусты три дня подряд поливайте ведром воды. Затем — по мере высыхания земли. На тяжелых глинистых почвах избегайте переувлажнения.

Уход за питомцем простой. Пока кустик маленький и слабый, после полива рыхлите под ним и выпалывайте сорняки.

Первую подкормку проведите через неделю после посадки. Примените жидкое комплексное удобрение для кустарников, как указано в инструкции.

Подкормить пузыреплодник желательно дважды за сезон. Весной требуются удобрения с азотом. Это может быть раствор коровяка или мочевины. Хороши комплексные жидкие удобрения. Их много в продаже.

Внесите их, когда начинают распускаться почки. Удобрения помогут кустику вырасти пышным и здоровым.

Осенью нужны фосфорно-калийные удобрения. Они подготовят растение к зимовке — прекратится рост и вызреет древесина.

Позаботьтесь о подкормках хотя бы первые два года. На заботливый уход пузыреплодник калинолистный благодарно отзовется быстрым ростом.

Болезни обходят это неприхотливое растение стороной. Но на молодые листочки в начале весны может напасть тля. Впрочем, такое случается редко. С этой напастью легко справиться, обрызгав кустик «Актарой».

Когда нужна обрезка

Весной осмотрите пузыреплодник. Вырежьте старые, сухие и сломанные ветки.

Природная форма растения довольно раскидистая. Оно может занять 3 м в ширину. При необходимости формирующую обрезку проводите после цветения.

Хотите получить широкий густой куст — обрежьте все ветви не выше 50 см. Нужен более стройный и ажурный — оставьте несколько крупных побегов и укоротите на высоте 1,5 м. Остальные вырежьте.

Стрижку пузыреплодник переносит хорошо. Первый раз ее проводят до распускания почек, желательно в апреле. Живую изгородь подстригают не менее двух раз за сезон.

Переезд на новое место

Если приходится пересаживать взрослый куст пузыреплодника калинолистного — делайте это до распускания почек. Или осенью, когда облетели листья.

Лиственные переносят осыпание земли с корней. Но все же постарайтесь сохранить ком как можно лучше. Тогда не повредятся мелкие всасывающие корешки, и растение быстрее справится со стрессом.

До пересадки проведите санитарную обрезку и укоротите все ветви до высоты 20-30 см. Так вы спасете пузыреплодник от обезвоживания, уменьшите нагрузку на пострадавшие корни.

После пересадки обработайте куст «Эпином». Он укрепит иммунную систему растения.

Один — это мало

Размножается культура легко. При желании из одного взрослого пузыреплодника выращивают саженцы на живую изгородь. Делают это разными способами:

семенами;
черенками;
отводками;
делением куста.

Мелкие, как мак, семена высевают под зиму в грунт. Или весной, со стратификацией в течение месяца в холодильнике.

Такой способ подходит для растений с зелеными листьями. Яркую листву сортов пузырника калинолистного сеянцы не наследуют.

Куст можно разделить, но на изгородь его не хватит. Способ подойдет, когда нужны 3-4 растения одного возраста.

Размножение черенками

Зеленые гибкие побеги срезают до начала цветения. Длина черенков — примерно 20 см. Они должны иметь не меньше двух междоузлий. Листья внизу удаляют, а вверху укорачивают.

Для ускорения корнеобразования черенки на ночь ставят в раствор Корневина. Или в ведро с водой кладут столовую ложку меда.

Высаживают в парничок под наклоном 45°. Регулярно поливают и проветривают. Зимой требуется укрытие.

Весной маленькие растения переводят в открытый грунт. В следующем году их определяют на постоянное место.

Размножение отводками

Весна — лучшее время размножать пузыреплодник. Для получения отводок выберите двухлетний побег. Он должен быть здоровым и расти наружу. Оборвите листья, оставив верхние.

Пригните ветку в канавку. Ее глубина — примерно 10 см. Засыпьте землей и прижмите в нескольких местах небольшими камнями. Верхушка с листьями остается наверху, привязанная к колышку.

Весь сезон поливайте отводку. Осенью отделите ее от основного куста, но не пересаживайте. Укройте лапником, сухими листьями или укрывным материалом на зиму.

Весной новый кустик готов к пересадке.

На вкус и на цвет. Разнообразие сортов

Используя растения с декоративными листьями, ландшафтные дизайнеры широко применяют в работе сорта пузыреплодника калинолистного.

Описание популярных сортов, часто встречающихся в продаже:

Ауреа — достигает высоты 2,5 м. Имеет мелкие белые цветы. Весной распускаются ярко-желтые листья. Ко времени цветения крона зеленеет. Осенью снова пожелтевшая листва красиво контрастирует с красными плодами.
Андре — достигает высоты 2,5 м. Весной широко раскидывает ветки с нежными розово-красными листочками. Летом цвет листьев темнеет, добавляется бронзовый оттенок.
Наггет — удивительная форма вазы высотой до 2 м. Изящные листья распускаются желтыми. По мере роста становятся зелеными.
Лютеус — быстро вырастает до 3 м. В роспуске листочки желтые с апельсиновым оттенком. Летом слегка зеленеют и красиво сочетаются с белыми цветками.
Дартс Голд — плотный шар диаметром 1,5 м. Листья из ярко-желтых немного зеленеют. Летом куст покрывается нежными белыми цветками. Иногда цветочные щитки розоватые.

У покупателей в садовых центрах пользуются спросом пузыреплодники калинолистные Ред — краснолистные сорта:

Ред Барон и Леди ин Ред. Кустарники компактные. Достигают высоты 1,2-2 м. Эффектные плотные щитки розоватых цветков и темно-красные блестящие листья. На них выделяются ярко-красные жилки.
Литтл Дэвил — небольшой кустик высотой 80-100 см. Красивый контраст темно -пурпурных листьев и светлых цветков. Осенью появляются красные плоды.
Пузыреплодник калинолистный Диабло — достигает высоты 3 м. Ветки раскидистые, немного поникающие. На фоне темно-красных резных листьев волшебно смотрятся нежно-розоватые цветки.

Осенью листья этих сортов не меняют окраску, оставаясь такими же яркими. Пузыреплодник имеет и карликовую форму Нана — кустик едва достигает высоты 1 м.

Слово ландшафтных дизайнеров

Благодаря пышным кронам с крупными листьями, плотным щиткам цветов и необычной формы семенным коробочкам пузыреплодник полюбился озеленителям и садоводам. И конечно, покорил неприхотливостью.

Разнообразие сортов растения позволяет комбинировать и добавлять цвет во все уголки сада или парка. Компактные сорта помогут оформить дорожки и границы газона.

Используя приемы садовой стрижки, можно создавать цветные живые изгороди у дома.

Пузыреплодник калинолистный (на фото выше) демонстрирует любимый прием ландшафтных дизайнеров — сочетание сортов с контрастным цветом листьев. Например, Рэд Барон, дающий красный акцент, часто высаживают вместе с желтыми сортами Лютеус или Дартс Голд.

Пурпурный Литтл Дэвил чередуют в одной линии с золотисто-зеленым Наггетом. Высадите их в один ряд. Получится пышный бордюр. А можно создать двухрядную изгородь из цветных лент, высадив сорта параллельными линиями.

Модные в садах высокие воздушные злаки эффектно выглядят на фоне темных листьев пузыреплодника калинолистного Диабло. Этот сорт может подчеркнуть нежность лавандовой перовскии. Дуэт с серебристой листвой стахиса византийского вносит торжественную нотку в парадную зону.

Неприхотливые пузыреплодники помогут решить проблему тенистых и влажных участков. Заберут из почвы лишнюю влагу. Украсят участок в местах, где трудно вырастить травянистые растения.

Компактные кустики высадите возле входа. Они не уступают в красоте капризным растениям и будут радовать ярким цветом.

Великолепная композиция получится с хвойными. Только представьте куст с розоватыми или оранжевыми листьями возле серебристой ели!

Подбейте пузыреплодник с красными листьями пионами молочноцветковыми. Нежные светлые цветы выразительно смотрятся на таком фоне в начале лета. Композиции с травянистыми многолетниками не потребуют много ухода.

Для сольного выступления выберите яркий и выразительный сорт и посадите его на солнечное место. В комфортных условиях пузыреплодник способен быстро разрастись в трехметровый куст. Прекрасный акцент в композиции сада!

Третья климатическая зона

Растения третьей зоны выстоят в морозы минус сорок градусов. Среди них много жителей наших лесов. Это кустарники, хвойные, травы. Они могут солировать на участке, а могут поддержать композицию садовых кустарников и многолетников.

Пузыреплодник относится к растениям третьей климатической зоны. Он достаточно морозостоек. Взрослые кусты не требуют укрытия на зиму. Правда, в сильные холода невызревшие концы веток подмерзают.

Молодые кустики, высаженные весной, а также укоренившиеся отводки и черенки на зиму лучше укрыть.

В ожидании морозной зимы

Внимательно следите за прогнозом погоды. До наступления морозов выше –10 °С успейте замульчировать приствольные круги торфом или землей. Мульчу применяют сухую, слоем 5-10 см.

Сохранить посадки поможет нетканый материал средней плотности «Агроспан-30» или «Агроспан-40». Материал позволяет растениям дышать и одновременно сохраняет тепло. Оберните куст или просто укройте в два слоя черенки.

Из подручных средств используют лапник или рубероид. Аккуратно стяните кустик шпагатом. Сделайте из рубероида конус и накройте молодое растение.

Взрослые пузыреплодники не требуют укрытия. Зимой иногда отряхивайте ветки от снега, особенно влажного. Этим вы спасете их от разломов.

Совсем немного времени и внимания — и пузыреплодник отблагодарит вас своей красотой и пышной зеленью.

Пузыреплодник калинолистный Диабло, описание и фото в ландшафтном дизайне

Пузыреплодник Диабло – декоративное растение, подходящее для выращивания начинающими садоводами. Благодаря яркой окраске листьев, нежным обильным цветам с приятным ароматом и необычным семенам кустарник на протяжении всего сезона вегетации не теряет своей привлекательности, а уход за ним не составляет труда.

Содержание статьи

Описание растения

Пузыреплодник калинолистный Диабло (лат. Physocarpus opulifolius Diabolo) – быстрорастущий, цветущий кустарник с раскидистой густой кроной в форме полусферы с диаметром около 3 м. В высоту пузыреплодник Диабло достигает 3 м. За год кустарник способен дать прирост около 40 – 45 см.

Листья крупнозубчатые, с вытянутой средней частью, состоящие из 3–5 лопастей. Их форма напоминает форму листовой пластины калины, что нашло отражение в названии этого сорта. Особый интерес представляет окраска листьев – в зависимости от места произрастания они имеют разный цвет. Так у растений, высаженных на солнечных участках, они темно-пурпурные. При выращивании кустарника в тени его листья имеют зеленый цвет с легким красновато-коричневым оттенком. Если солнечные лучи освещают куст неравномерно, окраска его кроны тоже будет разного цвета. Осенью листва пузыреплодника калинолистного Дьяболо не меняет цвет, а лишь немного бледнеет.

В июне на кусте появляются многочисленные цветы бело-розового оттенка диаметром немногим более 1 см. Красные тычинки и темно-желтая сердцевина придают им особенно нежный вид. Цветки образуют пушистые соцветия-щитки размером 6–8 см. Обычно цветение этого сорта длится 2–3 недели, но иногда продолжается и до двух месяцев.

В начале осени на месте цветов вызревают необычные объемные плоды, собранные в соцветия. Плодоносит этот кустарник коробочками-листовками, которые имеют декоративную ценность из-за необычной формы и пурпурной окраски.

Не теряют они привлекательности и зимой.

Использование в ландшафтном дизайне

Благодаря красивому декоративному виду и достаточно быстрому росту, пузыреплодник завоевал заслуженное место среди растений, используемых ландшафтными дизайнерами и садоводами-любителями при оформлении участков.

Если его посадить в центре газона и придать красивую форму кроне – это будет изюминкой в саду. Также за счет сочетания нескольких сортов пузыреплодника в живой изгороди, можно придать ей необычный вид.

Свое место в садах и на клумбах он получил еще одной своей особенности – его практически не поражают вредители и грибковые заболевания, которым подвержены большинство других растений.

Очень часто пузыреплодник Диабло используется в качестве живой изгороди. Плотная посадка и должный уход обеспечивают надежную защиту территории не только от проникновения, но и от посторонних глаз. Если сочетать сорт Диабло с другими разновидностями пузыреплодника, например, с сортом Ред Барон, можно получить интересные варианты разноуровневых живых изгородей с разным оттенком листвы.

Посадка пузыреплодника Диабло

Посадка калинолистного пузыреплодника Диабло не требует от цветовода особых навыков. Если правильно выбрать место и приложить минимальные усилия, кустарник может прожить до 40 лет, при этом со временем он не потеряет свой привлекательный вид.

Особенности саженцев

Саженцы пузыреплодника бывают 2 видов, от этого зависит также способ их посадки и степень приживаемости. Выделяют:

С закрытыми корнями. В этом случае растение выращивают в специальном контейнере и пересаживают методом перевалки в течение всего вегетативного периода. Это наиболее оптимальный вариант, так как он гарантирует практически 100 % приживаемость.
С открытой корневой системой. Куст выращивают в грунте, а затем выкапывают и продают. При этом на корешках остается минимум почвы. Такие растения можно сажать только ранней весной или осенью. Приживаемость у них гораздо хуже, чем у первого варианта.

Подготовка участка

Пузыреплодник может расти даже в условиях слабой освещенности, но при выращивании на открытом солнечном участке его листва приобретает необычный пурпурный цвет.

Кустарник нетребователен к составу почвы – он одинаково хорошо чувствует себя на субстратах любого типа, если они дренированы и в меру увлажнены. Лучшие почвы для него – плодородные супеси и суглинки. Единственное требование пузыреплодника – отсутствие застоя влаги. При заболоченности участка куст может погибнуть. По этой же причине нельзя высаживать пузыреплодник в местах с поверхностным залеганием грунтовых вод.

Как сажать

Если саженец пузыреплодника Диабло приобретен в контейнере, то сажать его можно весь сезон. Растение с открытой корневой системой высаживают весной, до начала вегетации или поздней осенью.

Посадка пузыреплодника Диабло очень проста и происходит по следующему алгоритму:

выкапывают посадочную яму в 2–3 раза превосходящую размеры корневого кома;
на дно горкой засыпают грунт на основе торфа или перегноя;
саженец с открытой корневой системой оставляют в воде на 3–5 часов, а затем сажают;
контейнерные растения помещают в яму вместе с земляным комом, засыпают питательным грунтом;
как и при посадке других кустарников и деревьев, заглублять корневую шейку не рекомендуется;

землю вокруг саженца хорошо поливают, в воду можно добавить стимулятор корнеобразования;
приствольный круг мульчируют.

При посадке живой изгороди саженцы пузыреплодника располагают в шахматном порядке, на расстоянии 40-50 см друг от друга.

Как размножить пузыреплодник Диабло

Получить новые растения калинолистного пузыреплодника Diabolo можно выгонкой из семян, черенкованием, делением куста и отводками.

Выращивание из семян

Наименее популярный метод размножения. Это связано с тем, что саженцы часто не берут лучшие внешние свойства от материнского растения и в результате может вырасти куст, сильно отличающийся от ожидаемого. Важно перед посадкой провести их стратификацию. То есть нужно организовать для их прорастания, среду, которая будет сильно походить на естественную.

Черенкование

Лучше заниматься укоренением черенков в конце лета. Для этого берут срезанные ветви, имеющие 2-3 и более соустий. Наиболее благоприятное время для посадки – ранее утро или вечер, когда нет сильного зноя. Нижнюю часть побега обрезают под углом 45 °, а верхнюю – горизонтально. При этом все листики отрывают. Предварительно стоит замочить подготовленные обрезки в специальном растворе для укоренения.

Затем сажают в контейнеры с песком и накрывают полиэтиленовой пленкой. Когда появятся молодые листы, утепление снимают, а саженцы перемещают в грунт на выбранное место на участке.

Перед наступлением холодов стоит утеплить посадки. Для этого используют лапник или опилки, которые предотвратят от вымерзания молодые кустики.

Деление куста

Выбранное растение выкапывают, острым ножом или лопатой делят на несколько частей, каждую из которых затем сажают в другое место.

Проводится эта манипуляция в весенний период до начала роспуска листиков. После разделения стоит прополоскать каждый отдельный кустик в слабом растворе перманганата калия. Важно также подрезать на ½ все ветки на растении, чтобы все силы шли на образование корневой системы, а не побегов с листвой. Поливают также по мере подсыхания верхнего слоя почвы.

Размножение отводками

Это самый простой способ размножения пузыреплодника. Осуществляют его следующим образом: в весенний период выбирают несколько побегов, направленных кнаружи от основного ствола. С них удаляют все листики, затем укладывают в приготовленную канавку, засыпают грунтом. Для укрепления, их прикрепляют деревянными или металлическими скобами к земле.

Хорошо для этого подходят обыкновенные шпильки. Уделяют большое внимание поливу. При этом важно, чтобы он был достаточным, но и не слишком обильным, иначе начнется загнивание только образующейся корневой системы и отводки погибнут. К началу осени, можно аккуратно отделить новое растение от материнского и пересадить на другое место с соблюдением всех правил.

При правильном уходе калинолистный пузыреплодник Диаболо будет долго радовать своих хозяев необычным и привлекательным внешним видом.

Пузыреплодник – декоративный фон для садовых акцентов

Многие садоводы в основном занимаются разведением одних цветов, и даже не думают о том, какую красоту придают цветочному участку декоративные кустарники и деревья. Причиной этому часто бывает нехватка земельного участка. Посадка кустарников имеет довольно много преимуществ перед цветами. Ведь они заполняют ту пустоту, которую не могут закрыть низкорослые малолиственные растения. И эта декорация придает насыщенность вашему садовому участку. Плюс ко всему – кустарники не требуют уход, как цветы. Их зелёная листва будет радовать вас с появлением первых почек и до самой глубокой осени.

[contents]

Знакомьтесь – пузыреплодник

Пузыреплодник (его иногда ошибочно называют спирея, хотя это разные растения) – удивительной окраски лиственный кустарник, который славится своей неприхотливостью, и вместе с этим шикарным декоративным видом. Посадка и уход за этим растением несложные и непринуждённые. Очень популярен пузыреплодник калинолистный. Он имеет два сорта с удивительно красивой листвой. Посмотрите на фото этого уникального кустарника.

Это растение относится к семейству Розовоцветных и имеет более 10 разновидностей. Оно представляет собой развесистый кустарник, который может достигать 2,5 м в диаметре. Его листья имеют такую же форму, как у калины или смородины. Этот куст имеет шикарные полушаровидные соцветия белого цвета. Цветочки не больших размеров, около 1 см.

Плоды пузыреплодника, имеющие форму вздутой листовки, изначально красного цвета, а в спелом возрасте приобретают светло-бурый оттенок.

Пузыреплодник калинолистный имеет два, очень полюбившиеся и популярные сорта среди цветоводов – Ауреа и Диабло. Они отличаются только окраской листьев. Для Диабло характерен стабильный цвет покровов на протяжении всего сезона, имеющий пурпурный оттенок. Он может слегка меняться только в период вегетации и приобретать тёмно-коричневый или фиолетовый цвет. Если же кустарник Диабло растёт в притенённом месте, то его листва будет разбавлена листьями зелёного оттенка. Для Ауреа характерный желтоватый с оранжевым оттенком цвет листьев в начале и в конце лета. В средине летнего периода листья имеют тусклый цвет. Яркий насыщенный цвет листья приобретают интенсивно, находясь на открытом солнечном участке. Посмотрите на фото, и вы увидите существенную разницу во внешнем виде этих двух сортов.

Существуют и другие разновидности этого кустарника

Пузыреплодник калинолистный Лютеус относится к жёлто-лиственным сортам, особенно если растёт на солнечном месте. Лютеус может вырасти до 3 метров в высоту. Белые полушаровидные соцветия и собранные в гроздья плоды красного цвета характеризуют кустарник Лютеус, как необычайно контрастный сорт пузыреплодника. Взгляните на его изумительное фото.

Многолетний кустарник Леди ин Ред – шикарный сорт. Этот вид изначально стали выращивать в Великобритании. Огромным преимуществом пузыреплодника Леди ин Ред есть неизменность в окраске на протяжении всего сезона. Он имеет ярко-красный цвет листьев. Леди ин Ред очень ценный вид за счёт буйного цветения, быстрого роста и абсолютной неприхотливости. Уход за этим кустом довольно простой. Леди ин Ред обладает такими важными качествами как морозостойкость и засухоустойчивость. Обрезка является одним из условий по уходу за видом, но Леди ин Ред очень хорошо её переносит. Для кустарника характерен рост длиной в 3 метра. Поэтому Леди ин Ред часто используют для загородных и городских насаждений в качестве контрастного дополнения к уже растущим растениям. Взгляните на фото этого изысканного кустарника.

Пузыреплодник калинолистный абсолютно всех сортов очень любит тепло, и для хорошего роста требует прямых солнечных лучей.
Поскольку у пузыреплодника масса преимуществ, и это растение считается неприхотливым, то и посадка его может осуществляться в любом месте. Единственное условие, которое вы должны учесть – это высадка на солнечном участке. Ввиду устойчивости растения к загазованному воздуху, его смело можно садить у дороги.

Как выращивать пузыреплодник?

Что же касается выращивания, то наилучшим вариантом будет приобретение уже готового растения, высаженного в горшочке. Так вы наверняка получите истинную окраску и свойства этого кустарника. Посадка пузыреплодника семенами не даст положительного результата, поэтому этот вариант лучше сразу исключить. Купив однажды саженец пузыреплодника, вы может его высадить в открытый грунт в любое время года, кроме зимы, конечно же. Выройте ямку глубиной в полметра, положите в неё небольшое количество перегноя или торфа, смешанных с садовым грунтом. Аккуратно достаньте растение из горшка, так, чтобы не повредить корневую систему. И заглубите растение на 5-7 см. Это необходимо для того, чтобы молодой кустарник выпустил новые побеги из имеющихся на нём почек. После этого растение нужно обильно полить, и после просыхания почвы, аккуратно её взрыхлить.

Рыхлая почва даёт возможность растению быстрее получить питательные вещества.

Как размножить и посадить куст пузыреплодника?

Процесс размножения пузыреплодника происходит двумя способами: черенкованием и отводками.

Размножение отводками осуществляется вначале весны, чтобы дать возможность растению укорениться. Для этого понадобиться здоровый побег, на котором обрывают все листочки, оставляя только те, что на верхушке. Далее отводок зарывают в грунт глубиной до 10-15 см и прищипывают к земле. В качестве прищепки можно использовать деревянные скобы. Последующий уход – регулярный полив, чтобы молодые корешки могли укорениться. С наступлением осени эти отросточки отделяются от основного растения и обязательно укутываются на зимовку.

Для размножения черенкованием будут нужны молодые зелёные побеги. Сначала их нужно срезать и замочить в воде, затем высадить в песчаный грунт, полить и накрыть плёнкой или пластиковыми бутылками.

Дальнейший уход заключается в регулярном поливе и проветривании. И только весной их уже можно будет высадить на открытый воздух. Посадка всех сортов пузыреплодника осуществляется одинаково и только этими двумя способами.

Уход за кустарником подразумевает три главных аспекта

Обрезка проводится в двух целях – для профилактики и для формирования декоративного вида куста. И тот и другой процесс осуществляется ранней весной. Санитарная обрезка заключается в удалении отмерших или повреждённых стеблей. Формирующую куст обрезку необходимо проводить на высоте не ниже 40 см с целью получения густо стебельного мощного кустарника.

Регулярность полива кустарника зависит от климатических условий, зоны его высадки. При повышенных температурах в летний период растение нужно поливать под корень минимум 2 раза в неделю объёмом в 40 литров воды. Чрезмерный полив может привести к поражению кустарника мучнистой росой. Здесь нужен грамотный уход.

Подкормка производится дважды в год – весной и осенью. При этом весной удобряют веществами, содержащими азот, а также мочевиной, коровяком, а осенью – минеральными удобрениями.

Уход за кустарником стоит того, чтобы в дальнейшем получить эту красочную лиственную декорацию.

Пузыреплодник ред барон посадка и уход в открытом грунте

Среди множества декоративных кустарников пузыреплодник Ред Барон занимает особое место. Никого не оставляет равнодушным раскидистый куст с ярко-красными, блестящими листьями, покрывающийся в начале лета большими бело-розовыми цветами. Сорт имеет высоту до 2-х. метров, и сохраняет окраску листьев в течении всего теплого периода.

Уход за пузыреплодником

Уход за растением не требует специальной подготовки. Хорошо растет на почвах разного состава, не теряет яркости листа в городских условиях. Переносит загрязненный автомобильными выбросами воздух.

Городские выхлопные газы растению не страшны

На открытых, солнечных участках листья пузыреплодника ярко-красные, образуют густую, плотную крону.

В полутени цвет сохраняется. В тенистых местах листья Ред Барона приобретают бурый оттенок в верхней части и зеленый внизу.

Несмотря на неприхотливость растения, нужно соблюдать необходимые условия, позволяющие пузыреплоднику хорошо расти.

Полив	Обязательный полив, в жаркое время 2-3 раза в неделю
Рыхление	Регулярно рыхлить почву около стволов. Соблюдать осторожность, чтобы не повредить корни
Обрезка	Два раза в год проводить обрезку
Подкормка	Весной и осенью осуществлять подкормку
Обработка почвы	Весной проводить санитарную обработку почвы вокруг растения

Высадка в открытом грунте

Высаживают саженцы в открытый грунт весной или осенью (апрель, октябрь). Если саженец имеет закрытые корни, т.е. сажается с комом земли на корнях, посадить его можно и летом. Подготовка ямы для саженца не занимает много времени.

Выкапываете яму достаточной глубины.
Выложить слой питательной почвы на дно.
Установить саженец и присыпать землей, смешанной с питательной почвой.
Питательная почва содержит в себе смесь равных долей: песок, торф, дерн, земля.

Как и с другими цветами, оптимальная почва – это сочетание нескольких компонентов

Ветки ствола должны быть закопаны в землю не более чем на 1-2 см. После усадки земли через пару дней, добавить землю сверху до ровной поверхности. Не окучивать.

При посадке молодого саженца удобрений не добавлять. Растение будет проходить естественную адаптацию и не сможет усвоить дополнительный прикорм.

После посадки пузыреплодник обильно полить. Через три-четыре дня произвести первое рыхление почвы.

Прикорневую зону обложить торфом для сохранения влаги.

В почве, на которую высаживают куст, не должно быть извести.

Пузыреплодник хорошо укореняется на любой почве, если отсутствует известь. На суглинистой, рыхлой почве он дает более яркий, пышный цвет как листьев, так и цветов. На скудной, песчаной почве, при своевременной подкормке его качества не теряются.

Регулярно поливать растение, но не чаще, чем 2 раза в неделю и хорошо дренировать.

Возможные болезни

Пузыреплодник Ред Барон очень устойчив к болезням и вредителям. Но для хорошего роста растению будет полезна гигиеническая обработка почвы весной бактериальными и противогрибковыми препаратами, такими как: Гамаир, Алирин, Фитоспорин.

Весной, при полном прогреве земли, необходимо добавить эти препараты в воду для полива. Дозировку рассчитывать по показаниям производителя. Одного полива будет достаточно на весь вегетативный сезон.

При большой скудости почвы у пузыреплодника может развиться пороз. Его проявления заметны сразу, молодые листья и побеги приобретают неестественный ржавый цвет и сохнут.

Устранить причину помогает препарат Филат железа и Фиролитам. Пороз у растения возникает из-за недостатка в почве железа. Поливка в корень железосодержащих препаратов быстро восстанавливает здоровье.

Для того чтобы снять химический стресс, полученный в результате обработки и поднять иммунитет растения используют антистрессовые препараты, такие как Экогель или Алирин.

Подкормка куста

Удобрять растение следует два раза в году. Использовать прикорм следующего состава:

Весной:

500 мл. коровяка.
25 мл. аммиачной селитры.
25 мл. мочевины.
10 л. воды.

Осенью:

500 мл. коровяка.
25 мл. мочевины.
25 мл. аммиачной селитры.
50 мл. нитрата фосфора.
10 л. воды.

Состав хорошо перемешать, расчет полива такой же как и весной.

Размножение пузырепложника

Размножение Ред Барона можно произвести вегетативно (), делением куста и семенем.

Отводкой

Это самый простой и эффективный способ размножить растение.

Как это сделать:

Весной, после появления первых листьев выбрать на взрослом кусте молодую и сильную ветку.
Удалить с нее нижние листья.
На нужном расстоянии подготовить яму глубиной до 15 см.
Уложить ветку в яму, осторожно ее согнув, пришпилить деревянными или железными скобами.
Засыпать яму землей или смесью земли с торфом.
Обильно полить.
До осени контролировать своевременный полив и рыхление почвы.
В октябре отделить отводку от куста, пересадить на выбранное место и укрыть на зиму.

Ред Барон дает выбор из нескольких способов размножения

Черенками

Перед выбросом цвета срезать молодые побеги длиной до 20 см., с обязательными двумя-тремя почечными междоузлиями.
Удалить с нижней части черенка все листья, оставшиеся укоротить наполовину.
Замочить в растворе Корневина на 2-3 дня, до появления первых признаков будущего корня.
Высадить в питательную почву. Почва для высадки черенков такого же состава, как и при посадке в грунт.
Укрыть саженцы пленкой. Регулярно поливать и проветривать. К осени черенок сформирует нужную корневую систему.
На зиму черенок укрыть. Пересадить на новое место весной.

Деление куста

Самый быстрый способ размножения и одновременно трудоемкий, т.к. взрослый куст может иметь достаточно развитую корневую систему.

Производить деление куста быстро, чтобы у растения не подсыхали корни:

Оголить полностью корень с той стороны, откуда планируете отрезать половину.
Отделить нужную часть куста, отрубив корень лопатой или любым другим острым инструментом.
Высадить растение в подготовленную яму. Засыпать питательной смесью.
Полить раствором Корневина.
Оставшийся куст подпитать Корневином.

Размножать пузыреплодник семенами в домашних условиях очень сложно и нецелесообразно. Поскольку Ред Барон находится в культуре не так давно, то через размножение семенем он теряет ряд декоративных качеств.

Обрезка

Ред Барон очень быстро растет и нуждается в обрезке. Если Вы хотите сохранить естественный, раскидистый рост веток потребуется санитарная обрезка весной.

Санитарная

Весной, до прогрева почвы срезают обломанные, мерзлые ветки, а так же побеги, растущие внутрь. Осенью, когда куст сбросил листву, его осматривают, обрезают лишние и сухие ветки.

Места срезов крупных побегов можно обработать садовым варом.

Формирующая

С пузыреплодника можно сформировать любую форму, круглую, квадратную, в форме фонтана.

Если садовод хочет получить куст с обильной листвой, которая благодаря своей красоте и цвету заменит цветы, обрезать следует ветки второго-третьего года и оставлять прошлогодние. Их легко отличить.

Годовые побеги весной выглядят почти черными, глянцевыми. Оставлять нужно хорошо перезимовавшие ветки. Они не дадут цветка, но принесут обильную листву.

Для обрезки рекомендуют использовать острые и чистые инструменты

Ветки, возраст которых два и более года, белесые, толще, на них хорошо заметны почки. Кора у взрослых веток может отслаиваться — это особенность вида. Эти ветви обязательно дадут много цветков.

Если предпочтение отдается цветку, то их следует сохранить, удаляя молодые побеги.

Омолаживающая обрезка пузыреплодника производится на 6 году. Куст обрезают на пень в октябре.

Уход зимой

Сорт Ред Барон морозоустойчив, хорошо переносит морозы до 10С. Если зима предполагается очень холодной, то куст лучше укрыть:

С наступлением первых холодных ночей куст осторожно стянуть шпагатом.
Обложить околоствольный круг торфом или стружкой.
Накрыть колпаком из рубероида. Можно использовать любой другой натуральный утеплитель.
Молодые экземпляры и саженцы всегда укрывать на зиму.

Ред барон

Сорт пузыреплодника Ред Барон считается самым ценным среди более чем 25 сортов растения. Его цветок достигает в диаметре 25-50 мм.

Ред Барон относится к калинолистному виду, он был привезен в Европу с Северной Америки, где он обычно растет у берегов рек. Ярко красный куст вырастает до 2-х метров. Листья пятилопастные, похожи на листья калины. Ствол бордовый.

Калинолистный пузыреплодник

Цвести пузыреплодник начинает в начале лета, выбрасывая белые с розовым отливом цветы. После цветения, к середине лета формируется плод. Гроздь состоит из 3-5 остроконечных мешочков.

В начале созревания плоды зеленые, постепенно краснеющие. К осени плоды приобретают блестящий красно-бордовый цвет.

Живая изгородь

Куст пузыреплодника образует широкое и плотное естественное ограждение. Благодаря быстрому росту с кустов можно легко сформировать прямоугольную или квадратную форму.

Часто растение высаживают плотным рядом у основания сеточного или проволочного забора. За сезон кусты разрастаются и полностью скрывают ограду.

Пузыреплодник хорошо высаживать в городах для озеленения дворов, улиц, аллей как живая изгородь.

Высаженный у железного забора пузыреплодник нужно всегда утеплять на зиму.

Сорта

Ред Барон часто называют благодарным растением из-за его стойкости к резким перепадам температур. Болезни редко поражают пузыреплодник, а такие вредители как гусеница, тля и жук предпочитают питаться другими растениями.

Выращивать растение в саду просто, уход за ним минимальный. Пузыреплодник, кроме сорта Ред Барон знаменит такими сортами:

Амурский вид

Лютеус	Куст до 3-х метров с ярко желтыми листьями, которые с наступлением осени темнеют
Аурео Маргината	Сорт имеет зеленые листья с золотым ободом
Нана	Сорт-карлик амурского вида, вырастает до 1,5 м. Имеет ярко зеленый лист

Краснолистный или калинолистный вид

Дьяболо. Сорт калинолистного (краснолистного) пузыреплодника до 3-х метров высоты. Листья имеет красные или бордовые. Цветы всех растений белые, белые с розовым отливом или бледно-розовые.

Разнообразие сортов пузыреплодника дает полное право назвать этот куст листоцветущим.

Яркость красок, которые отличают его от других кустарников на самом деле поразительна. Используя растение и для озеленения и для красоты, садоводы получают и наслаждение и экономию средств, т. к. саженцы растения сравнительно недороги.

Пузыреплодник калинолистный под названием «Red Baron» относится к числу самых интересных селекционных сортов. В средней полосе России он является излюбленным растением садоводов и владельцев питомников. Он хорошо переносит суровую зиму и засушливое лето, с благодарностью реагирует на своевременный, хотя и минимальный, уход. Кустарник все свои декоративные качества раскрывает на открытых солнечных участках сада. Ред барон хорошо растет и в полутени, но его листочки при этом теряют свой пурпурный окрас, становясь зелеными. Растение имеет и другие интересные особенности.

Пузыреплодник ред барон

Пузыреплодник ред барон — секреты декоративности

Этот сорт пузыреплодника декоративен во всем: листве, стеблях, цветах, плодах. Трехлопастная форма листьев схожа с формой листьев калины. Гофрированная листва имеет красивый пурпурный оттенок, который к осени становится более темным, бронзовым.

Шикарная густая крона образуется длинными побегами, изогнутыми дугой. Кора красно-коричневого цвета практически сливается с цветом листвы. Кульминацией декоративности считается время цветения калинолистного пузыреплодника red baron. Обычно к середине июня все кустарники уже отцветают. А вот этот сорт только начинают украшать розово-белые соцветия, состоящие из множества мелких цветочков. На фоне других растений «Ред барон» эффектно солирует. А поскольку он отлично переносит условия города, его можно встретить в парках, скверах, на улицах и в садах.

К осени на раскидистой кроне этого калинолистного пузыреплодника появляются удивительные плоды. Они имеют форму вздутых коробочек. При надавливании они издают звук, похожий на схлопывание пузыря. Отсюда произошло и название этого растения. Их цвет в процессе созревания и высыхания постепенно меняется от розовато-красного до рыжевато-бурого.

Не смотря на то, что полюбившийся всем кустарник, имеющий американское происхождение, можно встретить даже в палисадниках у сельских бабушек, не многие знают, как он называется. В народе за особенность сбрасывать кору во время вегетации его прозвали «бесстыдник». Старая кора отходит тонкими пластинками, а по всей длине побегов в это время уже просматривается нежная молодая кожица.

Особенности выращивания и правила ухода

Особенности посадки ред барона калинолистного практически ничем не отличаются от посадки других сортов пузыреплодника. Место для этого растения выбирают солнечное, чтобы листва проявила все свои декоративные качества. Ред барон калинолистный хорошо растет и в тени, но листочки при этом становятся зелеными. Кустарник будет выглядеть очень обыденно.

Выбирают молодые саженцы с открытой корневой системой ранней весной или осенью, до наступления первых заморозков. Внешний вид саженца расскажет о его здоровье. Корни перед началом посадки необходимо замочить в воде на два – три часа, чтобы они не были слишком сухими. Растения из контейнеров можно высаживать весь сезон.

Посадочные ямы роют на глубину 60 сантиметров, куда насыпают питательный грунт. Ред барон не предъявляет особых требований к состоянию почвы, но нуждается в хорошем дренажном слое. После посадки почву вокруг саженцев нужно хорошо утрамбовать и обильно полить.

Быстрорастущий кустарник обычно хорошо переносит сильные морозы. Но молоденькие побеги и верхушки старых ветвей могут вымерзать. Поэтому ранней весной нужно обязательно делать санитарную обрезку. Сорт пузыреплодника ред барон стригут также с целью придания какой-либо садовой формы. Это хорошо отражается на росте и дальнейшем развитии кустарника.

Растение хорошо переносит засуху, а вот от застоя влаги может погибнуть. Правила ухода за ним достаточно просты: своевременная обрезка, подкормка, достаточно редкий полив, рыхление почвы и удаление сорняков. К болезням и вредителям этот вид пузыреплодника очень устойчив. Однако, профилактическая обработка позволит избежать возможных проблем.

Быстрорастущее растение в течение 1 – 2 лет заполнит невыгодные пустоты в вашем саду. Высота кустарника может достигать 2 – 3 метров. Диаметр кроны такой же.

Размножают этот сорт пузыреплодника делением куста, отводками или черенками. Выращивание семенами не рекомендуется, поскольку молодые саженцы не возьмут все декоративные качества материнского растения.

Использование в ландшафтном дизайне

Роскошный внешний вид кустарника и его неприхотливость делают его излюбленным материалом специалистов по ландшафтному дизайну. Его можно встретить как на улицах города, так и в небольших поселках, на дачных участках. Он может быть элементом дизайна парадных входов и мест для проведения торжественных мероприятий.

Ред барон часто используют в сложных садовых композициях, где он может солировать, а также являться прекрасным фоном для цветов. Кустарник отлично выполняет роль солитера в подлесках на фоне хвойных и лиственных посадок.

Из этого вида пузыреплодника получаются шикарные, плотные живые изгороди, которые становятся настоящим украшением любого сада, дачного участка или какой-либо зоны отдыха. К тому же ухаживать за такой изгородью одно удовольствие. Работа не занимает много времени, а результат еще долго радует.

Кустарник отлично смотрится в одиночной или групповой посадке на газоне. Если его сочетать с другими видами растений и придать с помощью стрижки какую-либо садовую форму, то эффект будет просто потрясающий.

Среди большого количества декоративных растений только некоторые могут похвастаться абсолютной неприхотливостью и высокой декоративностью. К таким растениям относится и пузыреплодник калинолистный.

Выращивают это растение из-за его эффектного вида: шаровидная густая крона из раскидистых поникающих ветвей с крупными гофрированными листьями выглядит пышно сверху донизу.

Цветущий пузыреплодник

Посадка пузыреплодника

Растение терпимо относится к тени, но окрас листьев со временем при затенении блекнет, поэтому желательно этот кустарник высаживать на открытом и солнечном месте. К почве у кустарника всего два условия – отсутствие извести и наличие дренажа. Конечно же, более пышный вид у пузыреплодника будет на плодородной, рыхлой и свежей почве, но и на субстрате, бедном питательными веществами, он также будет выглядеть неплохо. Еще одним достоинством этого растения можно считать его устойчивость к загазованности воздуха, поэтому его можно спокойно высаживать рядом с дорогами.

Для посадки

пузыреплодника

семена желательно не использовать, так как свой оригинальный окрас листьев растение передает только части потомства. Лучше всего для первоначальной посадки приобрести в питомниках или садовых центрах растения с закрытой корневой системой, то есть выращенные в специальных контейнерах. Такие кусты можно высаживать в любой период вегетативного сезона (весной, летом или осенью). Для посадки необходимо выкопать яму глубиной и диаметром в 50 см, на дно которой добавляется садовый грунт на торфяной основе или

перегной

Посадка пузыреплодника

В дальнейшем куст пузыреплодника аккуратно достается из контейнера (главное при этом не повредить корневой ком и не расправлять его) и ставится в приготовленную посадочную яму. Затем яма засыпается плодородной почвой, а само растение желательно заглубить до 5 см – эта процедура поможет дать пузыреплоднику дополнительные побеги из спящих почек.

После этого обильно поливаем куст водой и раствором Корневина, как только вода впитается,

мульчируем

приствольный круг (для этого подойдет даже простая сухая земля). При такой обработке поверхностная корка не образуется и корни пузыреплодника смогут получить необходимое им количество воздуха.

Размножение пузыреплодника

Размножать пузыреплодник можно делением куста, отводками или черенкованием.

Размножение пузыреплодника отводками

Закладка отводков как способ размножения пузыреплодника, дает очень неплохие результаты. Для отводка необходимо выбрать здоровый и сильный побег, направленный наружу. С него удаляются практически все листья, оставляют только те, что на верхушке. Затем подготовленный побег укладываем в канавку (глубина канавки до 15 см) и пришпиливаем к земле (для этой цели отлично подойдут деревянные скобы).

Размножение пузыреплодника отводками. Фото с сайта agronomu.com Эту процедуру надо проводить в начале весеннего сезона, чтобы за оставшееся время до зимы отводок успел укорениться. Важно вовремя увлажнять почву в засушливые периоды – без увлажнения неокрепшие корни отводка могут погибнуть. В конце осеннего сезона молодые кусты пузыреплодника отделяются от материнского растения и укрываются на зиму.

Размножение пузыреплодника черенкованием

Для размножения пузыреплодника черенкованием необходимо использовать зеленые побеги, выросшие в текущем году. Отделенные побеги надо замочить в любом стимуляторе корнеобразования (например, в растворе того же Корневина) и высадить в субстрат песка с торфом или в речной песок.

Размножение пузыреплодника черенкованием. Фото с сайта agronomu.com После посадки поливаем черенки, затем укрываем их полиэтиленом. Если черенков мало, то можно укрыть каждый из них по отдельности пластиковыми бутылками с обрезанным горлышком. Последующий уход до зимнего сезона заключается в систематическом увлажнении и проветривании. С наступлением зимы укрываем укорененные черенки, а весной поросль пузыреплодника высаживаем на его постоянное место.

Уход за пузыреплодником

Пузыреплодник — растение в уходе неприхотливое, хотя некоторые особенности при этом присутствуют. Сам по себе кустарник живет до четверти века и в вегетативный период развивается быстрыми темпами. При хороших условиях за один год времени пузыреплодник способен прибавлять до 40 см как в высоту, так и в ширину. Поэтому для придания кусту нужной вам формы и стимуляции ветвления нужна тщательная обрезка.

Саму процедуру растение переносит стойко и безболезненно и в дальнейшем быстро обрастает молодыми побегами. Большой плюс кустарника — отличная зимостойкость, в средней полосе он зимует без укрытия, и только при сильных морозах могут повреждаться кончики побегов.

Семенные коробочки пузыреплодника сорта Luteus

Обрезка

Обрезка пузыреплоднику нужна как санитарная, так и кустоформирующая. Санитарная обрезка проводится в весенний период и состоит из обрезки поломанных и подмерзших ветвей. Ну а формирующая обрезка необходима для того чтобы куст не проказничал и рос так как вам требуется 🙂 Ее проводят также весной (до распускания почек на кусте) или осенью, после окончания вегетативного периода.

Так как большинство сортов пузыреплодника калинолистного выглядят фонтанообразно, то при правильной формирующей обрезке просыпаются и идут в рост верхние почки растения. Поэтому есть два основных варианта формирующей обрезки. Чтобы получить мощный и широкий куст с большим количеством стволов, обрезку проводим на высоте 40-50 см. А для придания кусту более выраженной фонтанообразной формы необходимо вырезать все тонкие побеги у основания куста, оставляя при этом до 5 наиболее крепких и мощных, которые, для стимуляции роста, также дополнительно обрезают на высоте 1,5 м.

Полив

Частота полива кустов пузыреплодника зависит от вида почвы, климатической зоны, где растет кустарник и его возраста. Если в районе произрастания растения возможны высокие температуры летом и куст высажен на легких суглинистых почвах, то поливать растение необходимо с конца весеннего сезона до наступления осени.

При этом полив делают регулярно (как минимум 2 раза в неделю), выливая под взрослое растение до 40 л воды. Когда куст пузыреплодника растет на газонах или на тяжелой глинистой почве, возможна другая опасность – перелив. При избыточном увлажнении куст пузыреплодника легко поражается мучнистой росой, а это может привести к гибели растения.

Подкормка

Подкормку пузыреплодника проводят в весенний и осенний периоды: ранней весной

азотосодержащими удобрениями

, а осенью

минеральными

. Весной используют коровяк, мочевину и аммиачную селитру (из расчета на 10 л воды берем пол-литровую банку коровяка, столовую ложку аммиачной селитры и мочевины).

Осенью можно использовать нитроаммофоску (1 спичечный коробок на 10 л воды). Взрослым растениям (10-20 лет) понадобится до 15 л раствора при подкормке.

Сорта пузыреплодника

Для декоративного украшения участка используют несколько сортов пузыреплодника калинолистного (

Physocarpus opulifolius

), которые обычно объединяют в две группы сортов: краснолистные и желтолистные.

К краснолистным относятся следующие сорта:

Пузыреплодник калинолистный Diablo

Вырастает до 3 м в высоту, листья глянцевые, пурпурно-красного оттенка. При посадке в затененном месте листва становится зеленой с чуть заметным пурпурным окрасом.

Пузыреплодник калинолистный, сорт Diablo

Пузыреплодник калинолистный Summer Wine

Кусты этого сорта вырастают до 2 м в высоту. Весной у листвы окрас винно-красного цвета, который летом меняется на зеленый.

Пузыреплодник калинолистный Summer Wine. Фото с сайта rydlingeplantskola.se

Пузыреплодник калинолистный Red Baron

Пузыреплодник «Ред Барон» радует розовыми цветами в момент цветения и красными ягодами в период их созревания. Вырастает до 2 м в высоту.

Пузыреплодник калинолистный Red Baron
К наиболее распространенным желтолистным сортам относятся следующие:

Пузыреплодник калинолистный Luteus

У пузыреплодника «Лютеус» высота кустов до 3 м, листья в тени зелено-желтого окраса, на открытых солнечных местах желтого оттенка.

Пузыреплодник калинолистный Luteus

Пузыреплодник калинолистный Dart’s Gold

Кусты этого сорта вырастают до 1,5 м, листья при распускании оранжево-желтого цвета, летом зеленые, а осенью желто-бронзового оттенка.

Пузыреплодни калинолистный Dart’s Gold. Фото с сайта flora-company.ru Пузыреплодник может отлично солировать или применяться в живых изгородях. Живая изгородь из пузыреплодника смотрится весьма декоративно, но требует постоянной обрезки и ухода. Зато она порадует вас меняющимися оттенками листвы в зависимости от сезона, красивыми цветами весной и красными ягодами осенью.

Как на городских клумбах, так и в частных палисадниках нередко можно заметить декоративное растение – пузыреплодник. Он имеет широкие и плоские листья различных цветов – от насыщенного зеленого до бордового. Пузыреплодник любят применять в ландшафтном дизайне благодаря его неприхотливости и холодостойкости, особенно такие его сорта, как «Ред барон», «Нанус», «Дартс Голд» и другие.

Пузыреплодник «Ред барон» – посадка и уход

«Ред барон» – один из наиболее интересных селекционных сортов пузыреплодника. Его название говорит само за себя: листья у этого растения имеют темно-красный цвет, а осенью приобретают бронзовый окрас. Что касается цветов пузыреплодника, то «Ред барон» отличается обильным цветением – куст этого растения буквально усыпан бледновато-розовыми некрупными цветками. Пузыреплодник этого сорта – плотный куст с густой кроной в форме полусферы (для этого его нужно своевременно стричь). Следует отметить, что «Барон» – эффектное растение, к тому же быстрорастущее. Пузыреплодник неплохо чувствует себя в городских условиях, он достаточно неприхотлив, растет и на солнце, и в полутени. Однако чем более затененное место вы выбрали для посадки, тем менее яркой будет листва у куста: в тени она обычно зеленеет.

Посадка калинолистного «Ред барона» ничем не отличается от прочих калинолистных пузыреплодников. Она производится весной (в идеале – до распускания листьев) либо осенью, в середине сентября. Корни перед посадкой желательно замочить на пару часов, а в посадочную яму 60 см глубиной – насыпать питательный грунт. К качеству и кислотности почвы пузыреплодник не требователен, но обратите внимание на необходимость в дренаже. После посадки растение хорошо полейте, а почву – утрамбуйте.

Данный сорт отличается своей морозостойкостью, однако верхушки веток и молодые побеги могут подмерзать в очень холодные и снежные зимы. Если такое произошло, весной вымерзшие части растений нужно обязательно обрезать.

Плохо переносит пузыреплодник застой влаги – его лучше засушить, чем переувлажнить. Парадоксально, но чем меньше внимания вы уделяете растению после посадки, тем лучше для него. Достаточно лишь периодически обрезать и поливать растение и рыхлить землю.

«Ред барон» растет быстро, и если в вашем саду имеются «проблемные» пустые места, пузыреплодник закроет их буквально за 1-2 года. В высоту куст достигает 1,5-2 м, примерно таким будет и диаметр кроны.

Волдыри на коже | ДермНет NZ

Автор: д-р Аманда Окли, дерматолог, Гамильтон, Новая Зеландия, 1997 г. Обновлено в сентябре 2015 г.

Что такое пузырчатая болезнь?

Заболевание с образованием пузырей — это состояние, при котором имеются поражения кожи, заполненные жидкостью.

Везикулы представляют собой небольшие пузыри диаметром менее 5 мм.
Булла – это более крупный волдырь. Обратите внимание, что множественное число слова булла — это буллы.
Волдыри могут лопнуть или верхушка волдыря может отслоиться, образуя эрозию. Экссудация серозной жидкости образует корочки.

Пузырчатые болезни

Острые заболевания с образованием пузырей

Острые заболевания с образованием пузырей могут быть генерализованными или локализованными в одном участке тела и быть вызваны инфекцией или воспалительными заболеваниями. Хотя чаще всего это экзема, генерализованные острые волдыри могут быть опасными для жизни и часто требуют госпитализации.

Острые состояния, связанные с образованием волдырей, следует исследовать путем взятия мазков на культуру бактерий и вирусов.Биопсия кожи может помочь в постановке диагноза.

Острые генерализованные пузырчатые заболевания

Острый фебрильный нейтрофильный дерматоз

Атипичная энтеровирусная инфекция

Ветряная оспа/ветряная оспа

Детские болезни; более серьезные у взрослых
Кожа головы, лицо, слизистая оболочка рта, туловище
Культура/ПЦР Вирус ветряной оспы

Герпетическая экзема

Дерматит

Полиморфная световая сыпь

Поражает участки тела, подверженные воздействию солнца (руки, верхняя часть груди, ступни
Папулы, бляшки, иногда мишеневидные
Майская запасная сторона
Возникает в течение нескольких часов после воздействия яркого солнечного света

Многоформная эритема

Реакция, например, на инфекцию
Острая сыпь в виде папул, бляшек, целевых поражений
Акральное распределение: щеки, локти, колени, кисти, стопы
Может быть мукозит (губы, конъюнктива, гениталии)

Синдром Стивенса-Джонсона/токсический эпидермальный некролиз

Пациент в очень плохом состоянии
Вовлечение слизистой оболочки
Почти всегда вызвано употреблением наркотиков
Редко из-за микоплазменной инфекции
Болезненная красная кожа может отслаиваться пластами или иметь множественные сливающиеся волдыри

Синдром гиперчувствительности к лекарственным средствам

Прием препарата начал за 8 недель до начала заболевания
Кореподобная сыпь с образованием пузырей (без некролиза)
Частое поражение слизистой оболочки
Полиорганное поражение (почечное, печеночное, респираторное, гематологическое)
Часто выраженная эозинофилия

Стафилококковый синдром ошпаренной кожи

Острые локализованные волдыри

Острый дерматит

Буллезное импетиго

Обморожение

Воздействие холода
Пурпурные зудящие/жгучие бляшки

Энтеровирусный везикулярный стоматит

Проходит через несколько дней

Рожистое воспаление

Фиксированная лекарственная сыпь

Повторяющаяся сыпь, обычно на одном и том же месте
Из-за периодического приема препарата в течение 24 часов после появления сыпи
Единичные или несколько поражений
Центральный блистер

Herpes simplex

Мономорфный пупковидный
Культура/ПЦР Вирус простого герпеса

Опоясывающий герпес (опоясывающий лишай)

Кожное распространение
Культура/ПЦР Вирус ветряной оспы

Укусы и укусы насекомых

Милиария

Центральный ствол
Потливость
Везикулы очень поверхностные

Некротический фасциит

Транзиторный акантолитический дерматоз

Острый или хронический
Пожилые мужчины
Зудящий или бессимптомный
Покрытые коркой папулы

Травма

Хронические пузырчатые заболевания

Диагностика хронических пузырчатых заболеваний часто требует биопсии кожи для гистопатологии и прямой иммунофлуоресценции. Анализ крови на специфические антитела (непрямая иммунофлуоресценция) также может оказаться полезным при постановке диагноза иммунобуллезной болезни.

Буллезный эпидермолиз

Различные типы, включая приобретенные и генетические формы
Начало при рождении или в раннем детстве

Fogo selvagem

Также называется эндемической листовидной пузырчаткой
Начало в детстве или подростковом возрасте

Мастоцитоз

Различные типы
Часто начинается в детстве

Доброкачественная семейная пузырчатка

Также называется болезнью Хейли-Хейли
Ограничено изгибами

Пузырьковые генодерматозы

Буллезная системная красная волчанка

Пациент с системной красной волчанкой
Субэпидермальные буллы

Буллезный пемфигоид

Преимущественно кожный (реже слизистый)
В основном поражает пожилых людей (редко младенцев, детей)
Субэпидермальные буллы
Предвестники экземы или крапивницы

Герпетиформный дерматит

Ассоциированная глютен-чувствительная энтеропатия
Сильный зуд; везикулы часто удаляются расчесыванием, оставляя эрозии
Симметрично на голове, плечах, локтях, коленях, ягодицах

Хроническое приобретенное образование пузырей

Другие иммунобуллезные заболевания

Поздняя кожная порфирия

Метаболическая фоточувствительность
Хрупкость кожи, буллы, милиумы
Тыльные стороны рук, лицо
Начало в среднем возрасте

Другие иммунобуллезные болезни

Атипичный эффектор Phytophthora sojae RxLR манипулирует переносом везикул хозяина, способствуя инфицированию

Abstract

У растений апопласт является важным полем битвы для взаимодействия растений и микробов. Растения секретируют белки, связанные с защитой, в апопласт, чтобы предотвратить вторжение патогенов. Как микробные патогены преодолевают апопластный иммунитет растений, остается в значительной степени неизвестным. В этом исследовании мы сообщили, что атипичный эффектор RxLR PsAvh281, секретируемый Phytophthora sojae , ингибирует секрецию апопластных белков, связанных с защитой растений. PsAvh281 локализуется на плазматической мембране растений и необходим для P . sojae инфекции. С помощью анализа ко-иммунопреципитации с последующим анализом жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии мы идентифицировали GmSNAP-1 сои в качестве кандидата-хозяина-мишени PsAvh281. GmSNAP-1 кодирует белок прикрепления растворимого фактора, чувствительного к N-этилмалеимиду (NSF), который связывается с GmNSF комплекса SNARE, функционирующего при перемещении везикул. PsAvh281 связывается с GmSNAP-1 in vivo и in vitro . PsAvh281 препятствует взаимодействию между GmSNAP-1 и GmNSF и блокирует секрецию белков, связанных с апопластной защитой, таких как белок PR-1, связанный с патогенезом, и апопластные протеазы. В совокупности эти данные показывают, что нетипичный P .Эффектор sojae RxLR подавляет апопластический иммунитет хозяина, манипулируя комплексом SNARE хозяина, чтобы вмешиваться в путь переноса везикул хозяина.

Резюме автора

Р . sojae секретирует эффекторы RxLR для модуляции иммунитета растения-хозяина. PsAvh281, атипичный эффектор RxLR P. sojae , способствует полной вирулентности P . сояэ . Однако механизм, с помощью которого PsAvh281 модулирует иммунитет растений, остается неизвестным.Мы обнаружили, что PsAvh281 локализуется на плазматической мембране растений, чтобы ингибировать секрецию белков, связанных с апопластной защитой, таких как GmGIP1, P69B и PR1. Мы провели скрининг белков-мишеней PsAvh281 с помощью анализа коиммунопреципитации и жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии. Было обнаружено, что PsAvh281 связывается с растворимым в сое белком прикрепления, чувствительным к N-этилмалеимиду (NSF), (GmSNAP-1), который является важным компонентом комплекса рецептора SNAP (SNARE) и играет важную роль в переносе везикул. Дальнейшее исследование показало, что PsAvh281 препятствует взаимодействию между GmSNAP-1 и GmNSF, тем самым блокируя секрецию белков, связанных с защитой, и тем самым модулируя иммунитет растений. Наши результаты показывают, как P . Эффектор sojae подавляет иммунитет растений, ингибируя секрецию белков, связанных с апопластной защитой.

Образец цитирования: Wang H, Guo B, Yang B, Li H, Xu Y, Zhu J, et al. (2021) Атипичный эффектор Phytophthora sojae RxLR манипулирует переносом везикул хозяина, чтобы способствовать инфекции.ПЛОС Патог 17(11): е1010104. https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010104

Редактор: Толга Бозкурт, Имперский колледж Лондона, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО

Получено: 25 августа 2021 г.; Принято: 10 ноября 2021 г .; Опубликовано: 29 ноября 2021 г.

Авторское право: © 2021 Wang et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные содержатся в рукописи и файлах вспомогательной информации.

Финансирование: Это исследование было поддержано грантами YW от Китайского национального фонда инновационных исследовательских групп (31721004) (http://www.nsfc.gov.cn/), ключевой программы Национального фонда естественных наук. Китая (32020103012) (http://www.nsfc.gov.cn/) и Технологическая система современной сельскохозяйственной промышленности Китая (CARS-004-PS14) (http://www.moa.gov.cn/). Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Пространство апопласта растений является основным местом взаимодействия хозяина и патогена [1]. При заражении микробными патогенами растения секретируют в апопласт многочисленные защитные белки, такие как протеазы и ингибиторы протеаз [1].Например, белки, связанные с патогенезом, такие как PR1 и PR5, представляют собой белки, связанные с резистентностью, которые секретируются в апопласт для защиты [2]. P69B, апопластная сериновая протеаза, принадлежащая к семейству внеклеточных субтилизиноподобных протеаз томата, способствует устойчивости к патогенам [3]. P69B расщепляет белок PC2, секретируемый Phytophthora infestans , что приводит к иммунитету хозяина [4]. C14 представляет собой папаин-подобную Cys-протеазу, секретируемую помидорами, которая способствует устойчивости к патогену оомицетов P . infestans [5]. При заражении P . sojae секретирует белок гликозидгидролазы 12 PsXEG1 в апопласты растений, в то время как PsXEG1 способствует инфицированию как основной фактор вирулентности [6]. GmGIP1 является ингибитором P . sojae апопластический эффектор PsXEG1 [6,7]. GmGIP1 может ингибировать активность фермента гидролазы и вирулентность PsXEG1, положительно регулируя иммунитет растений [7]. CDR1 представляет собой апопластную аспарагиновую протеазу из Arabidopsis , которая может повышать устойчивость к Pseudomonas syringae .Интересно, что GmAP1, ортолог CDR1 сои, также способствует защите [8,9].

Секреторные пути защитных белков играют важную роль в иммунитете растений [10]. Большинство апопластных белков процессируются в аппарате Гольджи и доставляются к плазматической мембране через везикулы [11,12]. После слияния пузырьков с плазматической мембраной растворимый белок прикрепления фактора, чувствительного к N-этилмалеимиду (SNAP), соединяется с фактором, чувствительным к N-этилмалеимиду (NSF), с образованием комплекса растворимого белка прикрепления фактора, чувствительного к N-этилмалеимиду (SNARE).Это позволяет диссоциировать комплекс SNARE и повторно использовать его для повторной сборки белками Sec1/Munc18 (SM) [11]. Повторно собранный комплекс SNARE управляет слиянием везикул с плазматической мембраной [11,13]. Сообщается, что растительный комплекс SNARE способствует устойчивости на уровне клеточной стенки [14]. Среди компонентов комплекса SNARE SNAP33 индуцируется патогенами и способствует секреции PR1 [15]. SYP121 и SYP132 принадлежат к Qa-SNARE и, как сообщалось, участвуют в секреции PR1 [16,17].Учитывая важность комплекса SNARE для иммунитета растений, его компоненты могут быть нацелены на эффекторы патогенов для блокирования секреции защитных молекул [10,18].

Во время инфекции микробные патогены выделяют в растительные клетки широкий спектр эффекторов для модуляции иммунитета растений [19–22]. Эффекторы RxLR представляют собой важный класс эффекторов у патогенов-оомицетов [23,24]. Несколько исследований показали, что эффекторы патогенов связываются с апопластными белками, подавляя их секрецию. Например, P .Эффектор Avrblb2 infestans RxLR может взаимодействовать с белком устойчивости к апопласту C14 и предотвращать его секрецию [5]. PsAvh340, эффектор RxLR P . sojae , может связывать и ингибировать секрецию GmAP1 [8]. Эффекторы также подавляют иммунитет растений, блокируя пути секреции белков. P . Эффектор Avr1 infestans RxLR может взаимодействовать с компонентом экзоцистного комплекса Sec5, ингибируя секрецию PR1 и модулируя иммунитет растений [25].Точно так же P . syringae Эффектор системы секреции III типа AvrPto нацеливается на RabE, чтобы влиять на секреторный путь растений и подавлять иммунитет растений [26]. Эффектор RxLR24 Phytophthora brassicae RxLR связывается с ГТФазой хозяина RABA-типа, чтобы ингибировать опосредованную везикулами секрецию антимикробного белка [27]. P . infestans Эффекторы PexRD12/31 ассоциированы с Nicotiana benthamiana Белок R-SNARE семейства VAMP72, а PexRD31 увеличивает количество эндосом у N .клетки benthamiana [28].

Р . sojae является возбудителем корневой гнили сои, представляющей серьезную угрозу мировому производству сои [29]. При заражении P . sojae секретирует сотни эффекторов RxLR для модуляции иммунитета растений [30]. В настоящем исследовании мы проанализировали, является ли P . Эффекторы sojae нацелены на системы секреции белка для модуляции иммунитета хозяина. PsAvh281 индуцируется на ранней стадии заражения и вызывает пожелтение листьев N . benthamiana [30]. В этом исследовании мы обнаружили, что PsAvh281 содержит атипичный мотив RxLR-dEER (RSLAAASEDITVKSSLRYGDALAADENDEER) и действует как фактор вирулентности. Дальнейшее исследование показало, что PsAvh281 локализуется на плазматической мембране и связывается с GmSNAP-1, препятствуя взаимодействию между GmSNAP-1 и GmNSF в комплексе SNARE. В результате PsAvh281 подавляет секрецию белков, связанных с апопластной защитой. Таким образом, наше исследование обнаружило новый механизм, который используют микробные патогены для модуляции иммунитета растений путем нарушения транспорта везикул-хозяев.

Результаты

Секреция GmGIP1, P69B и PR1 может ингибироваться PsAvh281

Поскольку GmGIP1 действует как важный компонент устойчивости сои, ингибируя P . sojae гликозидгидролазы PsXEG1 [7], мы определили, является ли P . sojae противостоит этому защитному механизму, препятствуя секреции GmGIP1 в апопласт. В нашей предыдущей работе мы обнаружили, что локализованный на плазматической мембране эффектор RxLR PsAvh340 может ингибировать секрецию GmAP1 [8].В Р . sojae , два других эффектора RxLR PsAvh281 и PsAvh341 также локализуются на плазматической мембране растений [31]. Мы разработали анализ для мониторинга секреции GmGIP1 с помощью конфокальной микроскопии. Мы слили зеленый флуоресцентный белок (GFP) с С-концом GmGIP1. GmGIP1-GFP коэкспрессировался с PsAvh281-HA, PsAvh340-HA, PsAvh341-HA или пустым вектором в листьях N . бентамиана . Поскольку зеленый флуоресцентный белок чувствителен к рН в апопласте [32], в межклеточном пространстве сигнал зеленой флуоресценции обнаружить не удалось. Сигнал GFP присутствовал в более мелких везикулярных структурах с соответствующими им белками, когда GmGIP1-GFP коэкспрессировался с PsAvh340-HA, PsAvh341-HA или пустым вектором (EV). Когда GmGIP1-GFP коэкспрессировался с PsAvh281-HA, GmGIP1-GFP накапливался во внутриклеточном пространстве растительных клеток, микроскопическое наблюдение показало, что сигнал GFP присутствовал в компартментах эндомембраны, таких как сеть эндоплазматического ретикулума (ER) (рис. 1A и S1). . Эффекторы RxLR PsAvh340 и PsAvh341, два локализованных на плазматической мембране эффектора, не смогли подавить секрецию GmGIP1 и использовались в этом анализе в качестве отрицательного контроля.Чтобы определить, подавляет ли PsAvh281 специфически секрецию GmGIP1, мы совместно экспрессировали GmGIP1-HA с GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh340, GFP-PsAvh341 или контролем GFP в N . benthamiana , а затем экстрагировали апопластную жидкость и определяли уровни белка GmGIP1-HA. Результаты показали, что при совместной экспрессии GmGIP1-HA с GFP-PsAvh281 уровни белка GmGIP1-HA в апопласте были ниже, чем при совместной экспрессии с GFP-PsAvh340, GFP-PsAvh341 или контролем GFP (рис. 1B). ).Приведенные выше результаты показали, что PsAvh281 ингибирует секрецию GmGIP1.

Рис. 1. Секреция GmGIP1 может ингибироваться PsAvh281.

(A) Субклеточная локализация PsAvh281-HA, PsAvh340-HA, PsAvh341-HA или пустого вектора при совместной экспрессии с GmGIP1-GFP через 48 ч после агроинфильтрации и исследовании с помощью конфокальной микроскопии. Каждое изображение конфокальной микроскопии представляет собой стопку из 16–30 одиночных срезов. Масштабная линейка, 20 мкм. (B) Накопление GmGIP1-HA в апопласте при совместной экспрессии с GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh340, GFP-PsAvh341 или GFP.Экстрагированную жидкость апопласта и общие белки определяли вестерн-блоттингом с использованием антител против GFP (Abmart) и против HA (Abmart). Экстракты апопластов окрашивали кумасси бриллиантовым синим (CBB), а внутриклеточные экстракты окрашивали Ponceau S. Цифры под блотом указывают относительное содержание GmGIP1-HA.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010104. g001

Чтобы подтвердить, что PsAvh281 ингибирует секрецию апопластных белков растений, мы совместно экспрессировали GFP-PsAvh281 с GmGIP1-HA, P69B-HA, PR1-HA. или GmAP1-HA в N . benthamiana и обнаружили накопление этих белков в апопластной жидкости. Накопление GmGIP1-HA, P69B-HA и PR1-HA в апопласте было значительно ниже при коэкспрессии с GFP-PsAvh281, чем с контролем GFP (рис. S2). Накопление GmAP1 не отличалось при совместной экспрессии с GFP-PsAvh281 по сравнению с контролем GFP, но было значительно ниже при совместной экспрессии с GFP-PsAvh340 (рис. S2). Эти результаты показали, что PsAvh281 может ингибировать секрецию апопластных белков GmGIP1, P69B и PR1.

PsAvh281 требуется для полной вирулентности

P . соя

PsAvh281 индуцируется на ранней стадии P . sojae [30] и сохраняется среди четырех секвенированных P . изолятов sojae (рис. S3). PsAvh281 содержит атипичный домен RxLR (RSLAAASEDITVKSSLRYGDALAADENDEER), чтобы определить, может ли N-конец PsAvh281 транслоцировать эффектор в растительные клетки, мы заменили N-конец Avr1b на N-конец PsAvh281 (до DEER) и создали мутант PsAvh281Nt. +Avr1bCt-GFP (фиг. S4A).Мы сверхэкспрессировали Avr1b-GFP, Avr1bCt-GFP (С-конец Avr1b) и PsAvh281Nt+Avr1bCt-GFP в P . sojae и исследовали, может ли N-конец PsAvh281 доставлять Avr1b в растительные клетки. Инокулированный гипокотиль сои PsAvh281Nt+Avr1bCt-GFP и PsAvh281Nt+Avr1bCt-GFP показал локализацию гаусторий (рис. S4B). Анализы инокуляции гипокотилей сои показали, что трансформанты, сверхэкспрессирующие Avr1b-GFP и PsAvh281Nt+Avr1bCt-GFP, неспособны инфицировать сорт сои HARO13, содержащий ген устойчивости Rps1b , но все еще могут инфицировать восприимчивый сорт Hefeng47 (рис. S4C).Напротив, P . Штамм sojae WT (P6497) и трансформанты, которые сверхэкспрессируют Avr1bCt-GFP, могут инфицировать сорт сои HARO13, содержащий ген устойчивости Rps1b (S4C Fig). Накопление каждого белка выявляли вестерн-блоттингом (фиг. S4D). В совокупности эти данные свидетельствуют о том, что N-конец PsAvh281 может транслоцировать эффектор в растительные клетки во время инфекции.

Чтобы изучить роль PsAvh281 в вирулентности P . sojae , мы выбили PsAvh281 в P . sojae с использованием CRISPR/Cas9 и получили четыре мутанта ( Avh281D-10 , Avh281D-36 , Avh281D-98 и Avh281D-106 ) для функционального анализа генов и SFigs 5s). Эти четыре делеционных мутанта PsAvh281 не показали существенной разницы в росте по сравнению с диким типом (WT) или контролем (CK) при культивировании на среде V8 (S5C и S5D Fig). Анализы инфекции показали, что делеционные мутанты PsAvh281 вызывали меньшие повреждения на гипокотиле сои по сравнению со штаммами WT и CK (рис. 2А).Анализ биомассы Phytophthora также показал, что удаление PsAvh281 снижает P . Инфекция sojae в гипокотиле сои (рис. 2В). Чтобы подтвердить вирулентную функцию PsAvh281, мы экспрессировали PsAvh281 (без сигнального пептида), слитый N-концевой GFP, в волосатых корнях сои и инокулировали трансформированные корни красным флуоресцентным белком (RFP), меченным P . сояэ . По сравнению с контролем EV (GFP), P . Инфекция sojae продуцировала больше ооспор в волосатых корнях, чем экспрессия GFP-PsAvh281 (рис. 2C и 2D).Соответственно, биомасса P . sojae в волосатых корнях, экспрессирующих PsAvh281, было намного выше, чем в контроле EV (рис. 2E). Вместе эти данные показали, что Avh281 необходим для полной вирулентности P. сояэ .

Рис. 2. PsAvh281 необходим для полной вирулентности P . sojae и локализуется на плазматической мембране.

(A) Симптомы заболевания, вызываемые нокаутными мутантами PsAvh281 на гипокотиле сои.Повреждения на гипокотиле фотографировали через 48 ч после инокуляции P . Sojae WT (P6497), PSAVH281 Rockout Mutrants AVH281D-10 , AVH281D-36 , AVH281D-98 , AVH281D-106 или CK (без нокаут-трансформанта, восстановленный из эксперимента по преобразованию нокаута) . Масштабные линейки, 5 мм. (B) Гистограмма показывает количественную биомассу P . sojae по результатам количественной ПЦР геномной ДНК.Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для трех повторов. Различные буквы в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (C) Экспрессия PsAvh281 в волосатых корнях сои способствует продвижению P . sojae инфекции. EV (GFP) и GFP-PsAvh281 коэкспрессировались в волосатых корнях сои и инокулировались RFP-меченым P . sojae , штамм P6497 (WT-RFP). Масштабные линейки, 0,2 мм. (D) Количественная оценка ооспор через 48 часов после инфицирования P6497 WT-RFP.Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для трех повторов. Звездочки в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (E) Относительная биомасса P . sojae в трансформированных волосатых корнях сои определяли с помощью количественной ПЦР через 48 часов после инокуляции. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти независимых биологических повторов. Звездочки в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (F) Субклеточная локализация PsAvh281.С-концевой RFP, помеченный PsAvh281, коэкспрессировался с GFP в N . бентамиана . GFP-PsAvh281 и коэкспрессировался с PsAvh340-RFP в N . бентамиана . Клетки эпидермиса в инфильтрированных тканях исследовали с помощью конфокальной микроскопии через 48 ч после агроинфильтрации. Шкала баров, 20 мкм. (G) Флуоресцентный анализ GFP/PsAvh281-RFP и GFP-PsAvh281/PsAvh340-RFP на разрезах мембраны (белые стрелки). ось Y — относительная интенсивность флуоресценции GFP или RFP; ось x, длина трансекты (мкм).(H) Обнаружение экспрессии белка в образцах, показанное на (F), с помощью вестерн-блоттинга с использованием антител против GFP и против RFP.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010104.g002

Для вирулентности требуется локализация PsAvh281 на плазматической мембране

Для дальнейшего изучения вирулентности PsAvh281 мы определили субклеточную локализацию PsAvh281 в N . benthamiana с помощью конфокальной микроскопии. PsAvh281 (без сигнального пептида), слитый с C-концевым RFP, коэкспрессировался с GFP в N . benthamiana , как показано на рис. 2F. PsAvh281-RFP и GFP-PsAvh281 локализуются преимущественно на плазматической мембране в нормальных условиях или при плазмолизе (фиг. S6D и S6E). Мы совместно экспрессировали GFP-PsAvh281 и PsAvh340-RFP, эффектор, локализованный в плазматической мембране, о котором сообщалось ранее, в P . sojae [8], в N . бентамиана . Белки выявляли вестерн-блоттингом (рис. 2Н). Объединенное изображение и интенсивность флуоресценции поперечных срезов клетки показали, что GFP-PsAvh281 локализован совместно с PsAvh340-RFP (рис. 2F и 2G).Мы также использовали реморин в качестве маркера локализации плазматической мембраны, поскольку сообщалось, что он локализуется на плазматической мембране [33,34]. Опять же, мы наблюдали совместную локализацию реморина и PsAvh281 в плазматической мембране (фиг. S6A и S6B). Эти результаты показали, что PsAvh281 локализуется на плазматической мембране в planta .

PsAvh281 кодирует эффектор RxLR, и мы предсказали третичную структуру белка PsAvh281 с помощью сервера моделирования структурной гомологии Swiss-model (https://swissmodel.expasy.org/) (рис. S7). PsAvh281 состоит из N-концевой α-спирали (70–95 аминокислот), за которой следуют три домена WY на С-конце. Основываясь на предсказанной третичной структуре, мы сконструировали два мутанта: PsAvh281-M1 (делеция аминокислот 70–95 в PsAvh281) и PsAvh281-M2 (аминокислоты 70–95 в PsAvh281) (рис. 3А). Мы совместно экспрессировали PsAvh281-RFP и два мутанта с GFP-PsAvh340, эффектором, локализованным на плазматической мембране, и исследовали локализацию PsAvh281-RFP и мутантов, белки были обнаружены вестерн-блоттингом (рис. S8A).Мы обнаружили, что мутантный PsAvh281-M1, у которого делетирован N-концевой домен α-спирали PsAvh281 (без сигнального пептида), локализуется в ядре и цитоплазме, но не в плазматической мембране (рис. 3B и 3C). Однако мутантный PsAvh281-M2, который содержал N-концевой домен α-спирали, все еще локализовался на плазматической мембране (рис. 3B и S6A). Мы также экстрагировали фракции мембран, и только PsAvh281-RFP и PsAvh281-M2-RFP, но не PsAvh281-M1-RFP были обнаружены во фракциях мембран с помощью вестерн-блоттинга (рис. S8B).

Рис. 3. Для вирулентности необходима локализация PsAvh281 в плазматической мембране.

(A) Схематическое изображение PsAvh281 и делеционных мутантов. (B) Субклеточные локализации PsAvh281, меченного C-концевым RFP, и производных мутантов. N-концевой GFP-меченый PsAvh340 использовали в качестве маркерного белка, локализованного в плазматической мембране. Шкала баров, 20 мкм. (C) Флуоресцентный анализ GFP-PsAvh340, коэкспрессирующий с PsAvh281-RFP, PsAvh281-M1-RFP или PsAvh281-M2-RFP на разрезах мембраны (белые стрелки). ось Y — относительная интенсивность флуоресценции GFP или RFP; ось x, длина трансекты (мкм).(Г) Р . sojae в волосистых корнях сои, экспрессирующих N-концевой GFP-меченный PsAvh281 или мутанты PsAvh281-M1 и PsAvh281-M2. Шкала баров, 0,2 мм (E) Количественное определение ооспор в зараженных волосатых корнях сои. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти независимых биологических повторов. Различные буквы в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (F) Относительная биомасса P . sojae определяли методом количественной ПЦР через 48 ч после инокуляции.Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти независимых биологических повторов. Различные буквы в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ).

https://doi. org/10.1371/journal.ppat.1010104.g003

Чтобы определить, являются ли эти домены важными для функции вирулентности PsAvh281, мы по отдельности сверхэкспрессировали GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh281-M1 и GFP-PsAvh281- М2 в волосистых корнях сои. Накопление белка выявляли вестерн-блоттингом (S8C Fig).Анализы инфекции показали, что экспрессия GFP-PsAvh281 значительно увеличилась P . sojae , но мутанты GFP-PsAvh281-M1 и PsAvh281-M2 не смогли этого сделать (рис. 3D-3F). Эти результаты показали, что локализация PsAvh281 на плазматической мембране необходима для его функции вирулентности.

PsAvh281 взаимодействует с белками GmSNAP, связанными с переносом везикул

Для дальнейшего изучения того, как PsAvh281 достигает вирулентности, мы экспрессировали GFP-PsAvh281 в N . benthamiana и анализировали целевые белки с помощью ко-иммунопреципитации (Co-IP) с последующей жидкостной хроматографией-тандемной масс-спектрометрией (LC-MS). Согласно данным ЖХ/МС коиммунопреципитации PsAvh281, были обнаружены множественные белки, связанные с секреторным путем (таблица S1). В сое есть три экземпляра SNAP, а также в N . benthamiana , мы клонировали три GmSNAP сои (рис. S9A) и три N . benthamiana NbSNAP (рис. S10A).Затем мы проверили, взаимодействуют ли GmSNAP с PsAvh281 в planta . N-концевой GFP-меченый GmSNAP-1 коэкспрессировался с C-концевым HA-меченым PsAvh281 или PsAvh340 в N . бентамиана . Мы обнаружили, что GFP-GmSNAP-1 взаимодействует с PsAvh281-HA, но не с PsAvh340-HA (рис. S9B). Кроме того, все три паралога GmSNAP взаимодействовали с PsAvh281 (рис. S9B и S9C). Эти результаты показали, что PsAvh281 может взаимодействовать с GmSNAPs in vivo . Выражая эти три SNAP сои в N . benthamiana , мы обнаружили, что все три SNAP сои способствуют защите растений от P . sojae (S9D и S9E рис.).

Поскольку все три протестированных SNAP способствовали защите растений, мы сосредоточились на GmSNAP-1 для дальнейшего анализа. Далее мы исследовали взаимодействия между GmSNAP-1 и мутантами PsAvh281. GmSNAP-1 взаимодействовал с PsAvh281 и PsAvh281-M2 in vivo и in vitro , но не с PsAvh281-M1 (фиг. 4A и 4B).Это указывает на то, что N-концевой домен из 70–95 аминокислот является ключевым участком для взаимодействия PsAvh281 с GmSNAP-1. Затем мы совместно экспрессировали GFP-GmSNAP-1 с PsAvh281-RFP, PsAvh281-M1-RFP или PsAvh281-M2-RFP и исследовали их внутриклеточную локализацию с помощью конфокальной микроскопии. Мы обнаружили, что GFP-GmSNAP-1 совместно локализован на плазматической мембране с PsAvh281-RFP и PsAvh281-M2-RFP, но не с PsAvh281-M1-RFP (рис. 4C и 4D). Белки выявляли вестерн-блоттингом (фиг. 4Е). Вместе эти данные продемонстрировали, что PsAvh281 взаимодействует с белком GmSNAP-1, связанным с переносом везикул, и что домен PsAvh281 из 70–95 аминокислот важен для этого взаимодействия.

Рис. 4. PsAvh281 взаимодействует с белками SNAP сои.

(A) GmSNAP-1 взаимодействует с PsAvh281, но не с мутантом PsAvh281-M1 (с делецией 70–95 аминокислот PsAvh281) in vivo . GmSNAP-1-HA коэкспрессировался с GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh281-M1 или GFP-PsAvh281-M2 в N . бентамиана . Суммарные белки очищали от N . benthamian a и ко-иммунопреципитацию с гранулами GFP-Trap_A. Соосаждение GmSNAP-1-HA было обнаружено с помощью вестерн-блоттинга.(B) PsAvh281 взаимодействует с GmSNAP in vitro . His-GmSNAP-1, MBP-PsAvh281, MBP-PsAvh281-M1, MBP-PsAvh281-M2 и MBP экспрессировались в Escherichia coli с MBP в качестве отрицательного контроля. Белки смешивали, как указано. His-pulldown выполняли с помощью Ni-NTA-агарозы, а захваченные белки определяли вестерн-блоттингом с использованием антител против His и против MBP. (C) Колокализация N-концевого GFP-меченого GmSNAP с RFP-меченым PsAvh281 или его мутантами. Шкала баров, 20 мкм.GFP-GmSNAP-1 коэкспрессировался с PsAvh281-RFP или мутантом (PsAvh281-M1-RFP или PsAvh281-M2-RFP) в N . бентамиана . Флуоресценцию клеток эпидермиса в инфильтрированных тканях выявляли с помощью конфокальной микроскопии через 48 ч после агроинфильтрации. (D) Флуоресцентный анализ GFP-GmSNAP-1 с PsAvh281-RFP, PsAvh281-M1-RFP или PsAvh281-M2-RFP (белые стрелки). ось Y, относительная интенсивность флуоресценции GFP или RFP; ось x, длина трансекты (мкм). (E) Рекомбинантные белки GFP-GmSNAP-1, коэкспрессированные с PsAvh281-RFP, PsAvh281-M1-RFP или PsAvh281-M2-RFP, были обнаружены в N .Листья benthamiana методом вестерн-блоттинга с использованием антител анти-GFP и анти-RFP.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010104.g004

PsAvh281 мешает работе комплекса GmSNAP-GmNSF

Белки

SNAP являются компонентами комплекса SNARE и играют важную роль в переносе везикул [11]. После слияния мембран SNAP рекрутирует чувствительный к N-этилмалеимиду фактор (NSF) в комплекс SNARE, чтобы обеспечить энергию для диссоциации и рециркуляции комплекса SNARE [11,13,35].Чтобы определить, взаимодействует ли PsAvh281 с SNAP, чтобы мешать комплексу SNARE, мы оценили взаимодействие между GFP-GmSNAP-1 и GmNSF-HA в planta с/без присутствия PsAvh281-RFP. Как показано на фиг. 5, PsAvh281-RFP конкурирует с GmNSF-HA за связывание с GFP-GmSNAP-1 дозозависимым образом (фиг. 5A). Кроме того, мы провели анализы конкурентного связывания in vitro с использованием His-GmSNAP-1, GST-GmNSF и MBP-PsAvh281, очищенных от Escherichia coli .После совместной инкубации добавление MBP-PsAvh281 значительно снижало взаимодействие между His-GmSNAP-1 и GST-GmNSF (рис. 5B).

Рис. 5. PsAvh281 может влиять на взаимодействие между GmSNAP и GmNSF как in vivo , так и in vitro .

(A) PsAvh281 препятствует взаимодействию между GmSNAP-1 и GmNSF в planta дозозависимым образом. PsAvh281-RFP коэкспрессировался с GFP-GmSNAP-1 и GmNSF-HA в N . бентамиана .Концентрации агробактерий были следующими: OD ₆₀₀ = 0,4 для GFP-GmSNAP-1 и GmNSF и OD ₆₀₀ = 0, 0,05, 0,2, 0,4 и 0,7 для PsAvh281-RFP. Белки были выделены из N . Листья benthamiana , собранные через 48 часов после агроинфильтрации, ко-иммунопреципитированные с гранулами GFP-Trap_A и обнаруженные с помощью вестерн-блоттинга с использованием антител против GFP, против HA и против RFP. (B) PsAvh281 препятствует взаимодействию между GmNSF и GmSNAP-1 in vitro .His-GmSNAP-1 и GST-GmNSF инкубировали с различными концентрациями MBP-PsAvh281 или MBP (отрицательный контроль). Были проведены анализы His-Pulldown, и белки были обнаружены с использованием антител против MBP, против His и GST. Концентрации MBP-PsAvh281 были следующими (мкг мкл ^-1 ): 1,5, 3, 6, 12 и 24. Эксперименты повторяли три раза.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010104.g005

Поскольку мутант PsAvh281-M2 взаимодействовал с GmSNAP, мы проверили, влияет ли PsAvh281-M2 на взаимодействие между GmSNAP-1 и GmNSF.Анализы Co-IP показали, что ни PsAvh281-M1, ни PsAvh281-M2 не нарушали взаимодействие между GmSNAP и GmNSF in vivo и in vitro (фиг. S11A и S11B). Эти результаты показали, что PsAvh281 нарушает взаимодействие между GmSNAP-1 и GmNSF in vivo и in vitro .

GmSNAP-опосредованная защита сои от

Phytophthora зависит от взаимодействия между GmSNAP и NSF

Чтобы определить, участвуют ли SNAP в P . sojae — инфекция сои, мы сверхэкспрессировали GmSNAP-1, слитый с N-концевой меткой GFP в волосатых корнях сои (рис. 6А). Трансгенные волосатые корни, экспрессирующие GmSNAP-1, собирали и инокулировали RFP-меченым P . соя (фиг. 6А). Р . Инфекция sojae продуцировала значительно меньше ооспор в волосатых корнях, экспрессирующих GFP-GmSNAP-1, по сравнению с контролем EV (GFP) (рис. 6A и 6B). Кроме того, P . Биомасса sojae также была значительно ниже в волосистых корнях сои со сверхэкспрессией GmSNAP-1 по сравнению с контролем GFP (рис. 6C).Чтобы дополнительно подтвердить биологическую функцию GmSNAP, мы заглушили GmSNAP в волосатых корнях сои, используя вектор молчания, который нацелен на GmSNAP-1 и два его гомолога, GmSNAP-2 и GmSNAP-3 (рис. 6E). Количественные анализы полимеразной цепной реакции в реальном времени (qRT-PCR) подтвердили успешное подавление GmSNAP в волосистых корнях сои (рис. 6H). После инокуляции RFP-меченым P . соя , биомасса Р . sojae в GmSNAPs -молчащие волосатые корни были намного выше по сравнению с контрольным пустым вектором (рис. 6E-6G).

Рис. 6. GmSNAP способствуют защите сои от P . сояэ .

(A) Анализ инфекции с использованием P sojae на волосистых корнях сои, экспрессирующих N-концевой GFP-меченый GmSNAP-1. Волосатые корни трансгенной сои инокулировали RFP, помеченным P . sojae WT (P6497) и исследовали с помощью флуоресцентной микроскопии. Масштабные линейки, 0,2 мм. (B) Количественное определение P . sojae Продукция ооспор через 48 ч после инокуляции.Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти повторов. Звездочки в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (C) Относительная биомасса P . sojae определяли методом количественной ПЦР с использованием геномной ДНК. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти повторов. Звездочки в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (D) Экспрессия EV (GFP) и GFP-GmSNAP-1 была обнаружена с помощью вестерн-блоттинга с использованием антитела против GFP.(E) Заражение RFP-меченым P . sojae в трансгенных GmSNAPs-молчащих волосистых корнях. (F) Количественная оценка производства ооспор через 48 часов после инокуляции. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти повторов. Звездочки в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (G) Заражение нокаутным мутантом PsAvh281 Avh281D-10 в GmSNAPs, заглушающих волосатые корни. Родственник P . Биомассу сои определяли с помощью количественной ПЦР геномной ДНК.Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти повторов. Различные буквы в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ). (H) Относительные уровни экспрессии GmSNAP-1 , GmSNAP-2 и GmSNAP-3 . Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти повторов. Звездочки в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,05 однофакторного дисперсионного анализа).

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010104.g006

Чтобы определить, являются ли GmSNAP важными мишенями для PsAvh281, мы провели тесты на инфицирование волосистых корней GmSNAP -silenced, используя мутант PsAvh281 -knockout -knockout . Avh281D-10 (фиг. 6G).Анализ биомассы показал, что подавление GmSNAP в волосатых корнях сои частично восстанавливало вирулентность Avh281D-10 (фиг. 6G). Эти данные показали, что PsAvh281 достигает вирулентности за счет связывания с GmSNAP и нарушения их функции. А вот Р . sojae биомасса в GmSNAPs — заглушенных корнях, зараженных Avh281D-10 , была все еще ниже, чем у инокулированных WT. Это может быть связано с дополнительными функциями PsAvh281 помимо его вмешательства во взаимодействие GmSNAP и GmNSF.

Кроме того, мы определили, зависит ли устойчивость GmSNAP от взаимодействия между GmSNAP и GmNSF. Мы предсказали ключевые сайты на GmSNAP-1, которые взаимодействуют с GmNSF, на основе структуры комплекса SNARE [13,36–38]. Путем мутации этих аминокислотных сайтов с образованием аланина (А) мы получили мутантный GmSNAP-M3 с 243–264 (DEED в AAAA) и 285–289 (EDDLT в AAAAA). Анализы Co-IP показали, что GmSNAP-M3 не может взаимодействовать с GmNSF, но все еще может взаимодействовать с PsAvh281 in vivo (S12A и S12B Fig).Чтобы определить, сохранил ли GmSNAP-M3 свою биологическую функцию, мы попытались сверхэкспрессировать GmSNAP-M3 в волосатых корнях сои, но не смогли получить трансгенные волосатые корни, сверхэкспрессирующие GmSNAP-M3. Вместо этого мы экспрессировали GmSNAP-1 и GmSNAP-M3 в N . benthamiana и выполнили анализы на инфицирование с использованием Phytophthora capsici (S12C и S12D Fig). По сравнению с N . benthamiana , экспрессирующих GmSNAP-1, листья, экспрессирующие GmSNAP-M3, имели гораздо более крупные поражения, подобные тем, которые экспрессировали контрольный GFP.Кроме того, диаметр поражения и относительный P . стручковый перец биомасса в N . Листья benthamiana , экспрессирующие GmSNAP-M3, были намного выше, чем у листьев, экспрессирующих GmSNAP-1, что свидетельствует о том, что мутант GmSNAP-M3 не может защищаться от Phytophthora (рис. S12C–S12F). Эти результаты показали, что GmSNAP способствуют устойчивости к Phytophthora на основе их взаимодействия с GmNSF.

SNAP необходимы для секреции GmGIP1, P69B и PR1

Поскольку SNAP играют важную роль в переносе везикул [11], мы оценили, было ли ингибирование секреции GmGIP1 с помощью PsAvh281 связано с его взаимодействием с SNAP. Мы исследовали, опосредуют ли SNAP секрецию GmGIP1, P69B и PR1. Поскольку PsAvh281 взаимодействует с NbSNAP (рис. S10A и S10B), мы заглушили NbSNAP в N . benthamiana (фиг. 7А). Заглушение NbSNAP повлияло на рост N . benthamiana (фиг. 7B). Мы сверхэкспрессировали GmGIP1-HA, P69B-HA, PR1-HA и GmAP1-HA в SNAP — с молчанием N . benthamiana и исследовали накопление этих белков в апопласте.Как апопластная жидкость, так и межклеточные белки были выделены и обнаружены вестерн-блот-анализом, который показал, что из апопластов растений TRV:: SNAPs было собрано значительно меньшее количество GmGIP1, P69B и PR1, чем из контрольных растений EV. Напротив, подавление SNAP не влияло на секрецию GmAP1 (фиг. 7C). Мы также слили GFP с апопластными белками GmGIP1, P69B, PR1 и GmAP1 и сверхэкспрессировали эти белки в TRV:: SNAPs N. бентамиана . По сравнению с контролем EV накопление GmGIP1-GFP, P69B-GFP и PR1-GFP в цитоплазматическом пространстве значительно увеличилось в TRV:: SNAPs-, обработанном N . benthamiana (рис. S13). Эти результаты показали, что SNAP необходимы для секреции GmGIP1, P69B и PR1.

Рис. 7. SNAP необходимы для секреции GmGIP1, P69B и PR1.

(A) Относительные уровни экспрессии NbSNAP1 , NbSNAP2 и NbSNAP3 в N . бентамиана . Обнаружено с помощью qRT-PCR. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для трех повторов. Звездочки в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,05; однофакторный дисперсионный анализ). (B) Морфология N . benthamiana растений, обработанных EV и TRV:: NbSNAP s. (C) Накопление C-концевых HA-меченных GmGIP1, P69B, PR1 и GmAP1 в апопластной жидкости NbSNAPs-, заглушенных N . бентамиана . Апопластную жидкость выделяли через 48 ч после агроинфильтрации.Апопласт и межклеточные белки выявляли вестерн-блоттингом с использованием антител анти-GFP и анти-HA. Экстракты апопластов окрашивали кумасси бриллиантовым синим (CBB), а внутриклеточные экстракты окрашивали Ponceau S. Цифры под блотом указывают относительное содержание GmGIP1-HA, P69B-HA, PR1-HA и GmAP1-HA. (D) Предлагаемая рабочая модель, показывающая механизм вирулентности PsAvh281.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1010104.g007

Затем мы определили, ингибирует ли PsAvh281 секрецию GmGIP1, P69B и PR1, влияя на взаимодействие между GmSNAP-1 и GmNSF.Мы совместно экспрессировали GmGIP1, P69B или PR1 с PsAvh281 и двумя мутантами в N . бентамиана . В то время как PsAvh281 значительно подавлял секрецию GmGIP1, P69B и PR1, ни PsAvh281-M1, ни PsAvh281-M2 не влияли на секрецию GmGIP1, P69B или PR1 (рис. S14).

Обсуждение

Хозяева секретируют защитные белки в апопласт при заражении патогенами [39,40]. Р . sojae секретирует PsXEG1, белок гликозидгидролазы 12 и основной фактор вирулентности, чтобы помочь инфекции [6]. Для сопротивления соя выделяет GmGIP1 в апопласт. В качестве ингибитора P . sojae эффектор апопласта PsXEG1, GmGIP1, как было предсказано, является аспарагиновой протеазой без ферментативной активности и способствует защите растений путем ингибирования активности гликозидгидролазы и функции вирулентности PsXEG1[7]. Мы выбрали GmGIP1 для скрининга эффекторов RxLR, которые могут ингибировать его секрецию. В предыдущей работе нашей группы мы обнаружили, что PsAvh340, эффектор, локализованный в плазматической мембране, может ингибировать секрецию GmAP1 [8].В этом исследовании мы обнаружили, что эффектор RxLR PsAvh281 ингибирует секрецию GmGIP1.

Эффекторы
RxLR представляют собой важную группу внутриклеточных эффекторов, секретируемых патогенами Phytophthora во время инфекции [24,41]. Многочисленные исследования показывают, что эффекторы RxLR секретируются в разные субклеточные компартменты для модуляции иммунитета растений [30,42]. В настоящем исследовании мы показали, что PsAvh281, локализованный в плазматической мембране атипичный эффектор RxLR, действует как фактор вирулентности, ингибируя секрецию апопластных протеаз, таких как GmGIP1, P69B и PR1.
PsAvh281 индуцируется на ранних стадиях P . sojae [30], а нокаут PsAvh281 снижает инфекционность. N-концевые аминокислоты 70–95 PsAvh281 необходимы для его локализации в плазматической мембране и функции вирулентности. Кроме того, мутант PsAvh281, содержащий аминокислоты 70–95 PsAvh281, все еще мог локализоваться на плазматической мембране, но не обладал вирулентной функцией. В совокупности эти результаты показали, что аминокислоты 70–95 PsAvh281 определяют локализацию плазматической мембраны, и что локализация плазматической мембраны и С-концевой эффекторный домен необходимы для вирулентной функции PsAvh281.
Здесь мы продемонстрировали, что PsAvh281 нацеливается на GmSNAP-1, белок доставки везикул, чтобы препятствовать секреции внеклеточных протеаз. Хотя некоторые другие белки, связанные с секреторным путем, были обнаружены в данных LC/MS ко-иммунопреципитации PsAvh281 (таблица S1), только GmSNAP взаимодействует с PsAvh281 в planta . SNAP играет роль в устойчивости растений при заражении патогенами [15,43,44]. Мы также подтвердили, что GmSNAP-1 способствует устойчивости растений к патогенам Phytophthora .GmSNAP-1 является компонентом комплекса SNARE. После того, как комплекс SNARE помогает везикулам сливаться с плазматической мембраной, SNAP объединяется с NSF, образуя SNARE, и обеспечивает энергию для диссоциации и рециркуляции комплекса SNARE [10,11]. Мы обнаружили, что PsAvh281 взаимодействует с GmSNAP и препятствует взаимодействию между GmSNAP и GmNSF. Хотя колонизация в GmSNAPs -RNAi Avh281D-10 не восстановилась полностью до уровня WT, колонизация WT примерно в 2,2 раза больше, чем Avh81D-10 в образцах EV, а колонизация WT составляет ~ 1.В 5 раз больше, чем Avh281D-10 в образцах GmSNAPs -RNAi (рис. 6G). Это может быть связано с дополнительными функциями PsAvh281 помимо его вмешательства во взаимодействие GmSNAP-GmNSF. Мутация ключевых С-концевых сайтов в GmSNAP-1 устранила взаимодействие с GmNSF, но не с PsAvh281, что указывает на то, что сайты взаимодействия GmSNAP с GmNSF и PsAvh281, вероятно, различаются.
В предыдущем исследовании, когда соя Rhg1 (устойчивость к глицинам Heterodera 1) была инфицирована глицинами Heterodera , высокие уровни α-SNAP резистентного типа мешают активности α-SNAP дикого типа и разрушают везикулы. трафик, способствуя защите, вызывая цитотоксичность и гибель клеток [45].GmSNAP-1 в этом исследовании эквивалентен нерезистентному аллелю дикого типа Rhg1 . Также сообщалось, что компоненты SNARE способствуют устойчивости хозяина. Синтаксин SYP132 способствует устойчивости растений к бактериям и секреции белка 1, связанного с патогенезом [16]. Взаимодействие между OsSYP121 и OsSNAP32 риса может способствовать устойчивости хозяина к пирикуляриозу риса [17]. Комплекс GmSNAP и GmNSF играет важную роль в слиянии мембран и перемещении везикул [11,13].В нашем предыдущем исследовании мы обнаружили, что PsAvh281 вызывает пожелтение N . benthamiana , который может подавляться другим эффектором PsAvh272 [30], что указывает на то, что Phytophthora может секретировать дополнительные эффекторы для подавления гибели клеток, вызванной цитотоксичностью. Мы обнаружили, что PsAvh281 препятствует взаимодействию между GmSNAP и GmNSF, а мутантный GmSNAP-M3 не может взаимодействовать с GmNSF и не способствует устойчивости растений. Это представляет собой новый механизм, с помощью которого эффектор подавляет иммунитет растений, препятствуя взаимодействию между двумя важными компонентами комплекса SNARE.
В соответствии с выводами, описанными выше, заглушение NbSNAP в N . benthamiana ингибировал секрецию апопластных протеаз, включая GmGIP1, P69B и PR1, но не другой апопластной протеазы (GmAP1). Это было похоже на функцию PsAvh281, который ингибирует секрецию GmGIP1, P69B и PR1, но не GmAP1. Секреторный путь для GmAP1 может отличаться от такового для GmGIP1, P69B и PR1 и P . sojae продуцирует другие эффекторы, такие как PsAvh340, для ингибирования секреции GmAP1.Более того, молчание NbSNAP не влияло на локализацию PsAvh281 (рис. S15), что означает, что локализация PsAvh281 в плазматической мембране не зависит от взаимодействия с GmSNAP. Вместе эти данные показали, что PsAvh281 достигает своей вирулентной функции, вмешиваясь в комплекс SNAP и NSF для подавления секреции апопластных протеаз.
Было показано, что несколько эффекторов ингибируют секрецию белков, связанных с апопластной защитой, для подавления иммунитета растений [5,8,25–27].PsAvh281 — первый P . Эффектор sojae RxLR подавляет секрецию GmGIP1, P69B и PR1 путем связывания с GmSNAP-1, важным компонентом комплекса SNARE. Эти результаты демонстрируют, что вмешательство в секрецию белков, связанных с апопластной защитой, является консервативной стратегией, используемой различными микробными патогенами для противодействия защите хозяина.
Это исследование дает новое представление о том, как патогены растений модулируют иммунитет растений, вмешиваясь в секрецию белка-хозяина.PsAvh281 ингибирует секрецию защитных белков растений, таких как GmGIP1, P69B и PR1, влияя на взаимодействие между GmSNAP и GmNSF (рис. 7D). Это открытие облегчит генную инженерию для усиления защиты растений за счет модификации мишени PsAvh281.
Материалы и методы
Растительные и патогенные материалы
Н . benthamiana и сою (Hefeng 47) выращивали в теплицах при 25°С. Н . растений benthamiana выращивали в течение примерно 5 недель.Растения сои выращивали в течение 5 дней. Р . соя и P . стручковых перцев культивировали на 10% среде V8 при 25°С в темноте.
Плазмидная конструкция
PsAvh281 был клонирован из P. кДНК sojae (P6497). GmSNAP-1 , GmSNAP-2 и GmSNAP-3 были клонированы из кДНК сои (Williams 82). NbSNAP-1 , NbSNAP-2 и NbSNAP-3 были клонированы из N .кДНК benthamiana . Фрагменты сливали с векторами путем гомологичной рекомбинации с помощью набора для клонирования In-Fusion HD (Clontech, Маунтин-Вью, Калифорния, США).
Трансформация
P . соя
Мутанты с делецией гена P . соя были получены с использованием стратегии замены гена CRISPR-Cas9 [46]. Опосредованная полиэтиленгликолем трансформация протопластов была описана ранее [47]. Ген PsAvh281 , лигированный с двумя генами 1.Фрагменты размером 0 т.п.н., фланкирующие ген-мишень, использовали в качестве донорной ДНК для направленной по гомологии репарации (фиг. S4A), праймеры, использованные для конструирования плазмиды, перечислены в таблице S2. Последовательности sgRNA, использованные для делеции гена PsAvh281 , следующие: GGAGCAGCGTCGATACATGT и CATGAAGTAGATCTGCGCGT.
Transient
Опосредованная Agrobacterium tumefaciens экспрессия белка в N . бентамиана Белки
были экспрессированы в N . benthamiana с использованием системы Agrobacterium tumefaciens (GV3101). А . Штаммы tumefaciens , несущие разные векторы, культивировали в среде LB при 30°С и 200 об/мин в течение 16 часов. Преобразованный A . tumefaciens инкубировали в среде LB при 30°C и 200 об/мин в течение примерно 16 часов. А . tumefaciens собирали и трижды промывали буфером [10 мМ MgCl2, 10 мМ MES (рН 5,7) и 100 мкМ ацетосирингона]. А . Клетки tumefacien ресуспендировали с использованием описанного выше буфера и инфильтрировали в листья N . benthamiana в соответствующих концентрациях. Проникновение N . benthamiana выдерживали в теплице в течение 24–48 часов и собирали для экстракции белка.
Ко-иммунопреципитация
Инфильтрованные листья растирали в жидком азоте и инкубировали в лизирующем буфере [10 мМ Трис-Cl (pH 7,5), 100 мМ NaCl, 0,5 мМ этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), 0,5% NP-40] с 1-кратным коктейлем ингибиторов протеазы (Sigma -Олдрич, Сент-Луис, Миссури, США) для выделения общего белка.Общий белок инкубировали с гранулами GFP-Trap_M (ABIN509397; ChromoTek, Planegg-Martinsried, Германия) в течение 2 часов при 4°C. Гранулы GFP-Trap_M собирали центрифугированием при 1000 × g в течение 2 минут и промывали буфером [10 мМ Tris-HCl (pH 7,5), 100 мМ NaCl, 0,5 мМ ЭДТА] три раза. Белок элюировали кипячением в течение 5 минут и анализировали на гелях додецилсульфата натрия-полиакриламида (SDS-PAGE) с последующим вестерн-блоттингом.
Белковый пулдаун-анализ
N-концевой меченный His GmSNAP-1 и меченный MBP PsAvh281 экспрессировались в E . coli (штамм BL21). Очищенные белки растворяли в 1× фосфатно-солевом буфере (PBS) с 1 мМ фенилметилсульфонилом (PMSF). His-GmSNAP инкубировали с Ni-NTA-агарозой в течение 2 ч при 4°C. Шарики добавляли к общему белку, экстрагированному из супернатанта E . coli , экспрессирующих MBP-PsAvh281, и инкубировали в течение 3 ч при 4°С. Агарозу Ni-NTA четыре раза промывали 1× буфером PBS. Белки элюировали кипячением буфера для загрузки SDS в течение 5 минут, а затем анализировали с помощью SDS-PAGE и вестерн-блоттинга.His-GmSNAP обнаруживали с использованием анти-His-антитела (Abmart, Шанхай, Китай). MBP-PsAvh281 был обнаружен с использованием антитела против MBP (CMCTAG).
Трансформация волосатого корня сои
Из 6-дневных посевов было собрано
семядоли сои. Семядоли стерилизовали в течение 7 мин 10% хлорноватистой кислотой, затем 70% этанолом в течение 90 с, после чего трижды промывали стерильной водой. Agrobacterium rhizogenes (K599), несущий вектор GFP-GmSNAP-1, трижды промывали буфером [10 мМ MgCl2, 10 мМ MES (pH 5.7) и 100 мкМ ацетосирингона]. Семядоли инокулировали 30 мкл суспензии A. rhizogenes [оптическая плотность при 600 нм (OD600) = 0,5] и выдерживали на 1/2 среде Мурасиге-Скуга (МС) в течение 2 недель. Трансгенные волосатые корни идентифицировали с помощью флуоресцентной микроскопии.
Q-RT-PCR
РНК
выделяли с использованием набора Total RNA Kit I (Omega Bio-Tek, Норкросс, Джорджия, США). кДНК синтезировали с использованием HiScript II Q RT SuperMix для ПЦР (Vazyme Biotech Co., Ltd., Нанкин, Китай), а затем использовали для количественной ОТ-ПЦР с помощью SYBR qPCR Master Mix (Vazyme) и праймеров, перечисленных в таблице S2.
Сбор апопластической жидкости
GmGIP1-HA, P69B-HA и GmAP1-HA временно экспрессировались в N . бентамиана . Н . Листья benthamiana собирали через 48 часов после агроинфильтрации и замачивали в 1× буфере PBS в вакуумном сосуде. Затем держите вакуумный сосуд в -10 фунтов на квадратный дюйм в течение 1 мин, медленно открывайте впускной клапан, инфильтрируйте инфильтрат буфера 1 × PBS в ткань N . benthamiana листьев. Апопластическую жидкость собирали центрифугированием при 4°С и 1000×g в течение 5 мин.
Индуцированное вирусом замалчивание генов (VIGS)
Фрагменты молчания для SNAP были разработаны с использованием инструмента SGN VIGS (https://vigs.solgenomics.net) и вставлены в векторы TRV2 посредством гомологичной рекомбинации. Полученные векторы TRV2 трансформировали в A . тумефациенс (GV3101). Для инфильтрации A . tumefaciens , несущий TRV2: SNAPs или TRV2: EV был смешан с A . tumefaciens , несущих TRV1 в соотношении 1:1, и концентрацию доводили до OD600 = 1 для каждого.Смешанный A . Суспензию tumefaciens инфильтрировали в семядоли 2-недельного растения N . бентамиана .
Наблюдение с помощью конфокальной микроскопии
Н . Листья benthamiana собирали через 48 часов после агроинфильтрации и исследовали с помощью лазерного сканирующего микроскопа LSM 710 (Carl Zeiss, Йена, Германия). Длины волн возбуждения GFP и RFP составляли 488 нм и 561 нм соответственно. Длина волны излучения GFP и RFP составляла 495–530 нм и 600–650 нм соответственно.
Статистика относительной численности
Абсолютное содержание полос вестерн-блоттинга подсчитывали с помощью программного обеспечения Odyssey V 3.0. Относительная численность представляла собой абсолютную численность остальных полос по сравнению с абсолютной численностью первой полосы, необходимой для подсчета численности в каждом изображении вестерн-блоттинга.
Вспомогательная информация
S1 Рис. GmGIP1 локализуется в сети эндоплазматического ретикулума (ER), когда секреция GmGIP1 ингибируется PsAvh281.
(A) Субклеточная локализация GmGIP1-GFP при совместной экспрессии с PsAvh281-HA или PsAvh340-HA.SP-RFP-HDEL использовали в качестве маркера локализации ER. Флуоресценцию клеток эпидермиса в инфильтрированных листьях наблюдали с помощью конфокальной микроскопии через 48 ч после агроинфильтрации. Шкала баров, 20 мкм. (B) Экспрессия GmGIP1-GFP, SP-RFP-HDEL и эффекторов, меченных HA, была подтверждена вестерн-блоттингом с использованием антител против GFP, против RFP и против HA.
10.1371/журнал.ppat.1010104.s001
(TIF)
S2 Рис. PsAvh281 ингибирует секрецию GmGIP1, P69B и PR1.
Накопление GmGIP1-HA, P69B-HA, PR1-HA и GmAP1-HA в апопласте при совместной экспрессии с GFP, GFP-PsAvh281 или GFP-PsAvh340.Экстрагированную жидкость апопласта и общие белки определяли вестерн-блоттингом с использованием антител против GFP (Abmart) и против HA (Abmart). Экстракты апопластов окрашивали кумасси бриллиантовым синим (CBB), а внутриклеточные экстракты окрашивали Ponceau S. Цифры под пятном указывают относительное содержание белков, меченных HA.
10.1371/journal.ppat.1010104.s002
(TIF)
S4 Рис. N-конец PsAvh281 может обеспечивать проникновение эффектора в растительные клетки.
(A) Структура полноразмерного Avr1b, С-конца Avr1b (Avr1bCt: удаление сигнального пептида и RxLR-dEER Avr1b) и Avr1bCt, слитого с N-концом PsAvh281 (PsAvh281Nt: сигнальный пептид) и домен RxLA-dEER PsAvh281). (Б) Р . sojae , экспрессирующих Avr1b-GFP и PsAvh281Nt+Avr1bCt-GFP, показали гаусториальную локализацию во время инфекции. Наблюдал P . sojae -инфицированные гифы сои с помощью конфокальной микроскопии через 12 ч после инокуляции.Шкала баров 20 мкм. (C) Фенотипы гипокотилей сортов сои HARO13 ( Rps1b ) и Hefeng47 инокулировали P . трансформантов sojae и WT (P6497). Фотографии сделаны через 48 часов после заражения. (D) Белки трансформантов, экспрессирующих Avr1b-GFP, Avr1bCt-GFP и PsAvh281Nt+Avr1bCt-GFP, обнаруженные вестерн-блоттингом с использованием антитела против GFP.
10.1371/journal.ppat.1010104.s004
(TIF)
S5 Рис. Характеристика нокаутных мутантов
PsAvh281 .
(A) PsAvh281 был нокаутирован с использованием системы CRISPR/Cas9. Нокаутные мутанты выявляли с помощью прямого и обратного праймеров. Последовательности показали, что оба конца находятся на 1 т.п.н. выше и ниже 1 т.п.н. PsAvh281 в геноме, а последовательность PsAvh281 показана в середине. Секвенирование Сэнгером следов областей соединения, подтверждающее, что PsAvh281 был удален в геноме. (B) Результаты ПЦР, проведенной с использованием геномной ДНК в качестве матрицы и прямых и обратных праймеров.(C) и (D) Скорость роста нокаутных мутантов PsAvh281 . Никаких существенных различий не наблюдалось между WT, CK и нокаутными мутантами PsAvh281 на основе одностороннего ANOVA.
10.1371/journal.ppat.1010104.s005
(TIF)
S6 Рис. PsAvh281 локализуется на плазматической мембране в
N . бентамиана .
(A) Субклеточная локализация GFP-PsAvh281 и его мутантов в N . бентамиана . GFP-PsAvh281 и его мутанты коэкспрессировались с реморином-RFP в качестве маркера локализации в плазматической мембране в N . бентамиана . Флуоресценцию клеток эпидермиса в инфильтрированных листьях наблюдали с помощью конфокальной микроскопии через 48 ч после агроинфильтрации. Шкала баров, 20 мкм. (B) Анализ статистики флуоресценции GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh281M1 или GFP-PsAvh281-M2 с реморином-RFP на разрезах мембраны (белые стрелки). ось Y, относительная интенсивность флуоресценции GFP или RFP; ось x, длина трансекты (мкм). (C) Вестерн-блот образцов, экспрессирующих реморин-RFP с GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh281M1 или GFP-PsAvh281-M2.(D) и (E) Субклеточная локализация PsAvh281-RFP и GFP-PsAvh281. PsAvh281-RFP или GFP-PsAvh281 временно экспрессировался в N . бентамиана . Инфильтрованные листья обрабатывали 1М раствором NaCl в течение 1 мин для плазмолиза. Образцы исследовали с помощью конфокальной микроскопии.
10.1371/журнал.ppat.1010104.s006
(TIF)
S7 Рис. Прогнозируемая третичная структура PsAvh281.
Третичная структура белка PsAvh281 была предсказана сервером моделирования структурной гомологии Swiss-model (https://swissmodel.expasy.org/), а эффектор RxLR 240 использовали в качестве матрицы, которая имеет 25% идентичность последовательности с PsAvh281. Изображение было сгенерировано с помощью PyMOL. Зеленая метка представляет собой первую α-спираль на N-конце PsAvh281 (без сигнального пептида и домена RxLA-dEER), розовая метка, желтая метка и желтая метка представляют собой предполагаемые домены WY PsAvh281. Серые метки на картинке — это домены ссылок между доменами WY.
10.1371/journal.ppat.1010104.s007
(TIF)
S8 Рис.Белки были обнаружены в
N . Листья benthamiana и опушенные корни сои методом вестерн-блоттинга.
(A) Белки были обнаружены в N . Листья benthamiana , совместно экспрессирующие GFP-PsAVh340 с PsAvh281-RFP, PsAvh281-M1-RFP или PsAvh281-M2-RFP, были получены методом вестерн-блоттинга с использованием антител против GFP и против RFP. (B) PsAvh281 и PsAvh281-M2 обнаруживаются во фрагментах мембраны с помощью вестерн-блоттинга с использованием антитела против RFP. Вестерн-блот анализ белков из N .Листья benthamiana временно экспрессируют PsAvh281-RFP, PsAvh281-M1-RFP и PsAvh281-M2-RFP посредством агроинфильтрации. (C) Белки были обнаружены в волосатых корнях сои со сверхэкспрессией GFP, GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh281-M1 и GFP-PsAvh281-M2 с помощью вестерн-блоттинга с использованием антитела против GFP.
10.1371/журнал.ppat.1010104.s008
(TIF)
S9 Рис. GmSNAP могут взаимодействовать с PsAvh281.
(A) Выравнивание последовательностей GmSNAP и его гомологов в сое.Данные последовательности для GmSNAP-1, GmSNAP-2 и GmSNAP-3 были депонированы в Phytozome (https://phytozome-next. jgi.doe.gov/), коды доступа Phytozome: Glyma.18G022500.1 (GmSNAP-1). ), Glyma.11G234500.1 (GmSNAP-2) и Glyma.14G054900.1 (GmSNAP-3). (B) PsAvh281 взаимодействует с GmSNAP-1 in vivo . Суммарные белки экстрагировали из N . benthamiana , ко-иммунопреципитация с использованием агаровых шариков GFP-Trap_A и выявление вестерн-блоттингом с использованием антител против GFP и против HA.(C) PsAvh281 взаимодействует с GmSNAP-1, GmSNAP-2 и GmSNAP-3 in vivo . Суммарные белки экстрагировали из N . benthamiana , ко-иммунопреципитация с использованием агаровых шариков GFP-Trap_A и выявление вестерн-блоттингом с использованием антител против GFP и против HA. (D) Экспрессия GmSNAP-1, GmSNAP-2 и GmSNAP-3 обеспечивает N . benthamiana с устойчивостью к P . стручковый перец . GmSNAP экспрессировался в N . benthamiana с последующей инокуляцией P . стручковый перец Через 48 ч после агроинфильтрации. Зараженные листья фотографировали через 48 ч после инокуляции. (E) Повреждения на N . Листья benthamiana , экспрессирующие GmSNAP. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти повторов. Различные буквы в верхней части столбцов указывают на значительные различия ( P < 0,05; однофакторный дисперсионный анализ). (F) Экспрессия GFP и GmSNAP, меченных GFP, была подтверждена вестерн-блоттингом с использованием антитела против GFP.
10.1371/журнал.ппат.1010104.s009
(ТИФ)
S10 Фиг. Гомологи GmSNAP в
N . benthamiana может взаимодействовать с PsAvh281.
(A) Выравнивание последовательностей GmSNAP и его гомологов в N . бентамиана . Данные последовательности для NbSNAP-1, NbSNAP-2 и NbSNAP-3 были депонированы в сети Sol Genomics Network (https://solgenomics.net/tools/blast/), коды доступа к сети Sol Genomics: Niben101Scf00819g06008.1 (NbSNAP-1). ), Niben101Scf05329g00003. 1 (NbSNAP-2) и Niben101Scf11337g00009.1 (НбСНАП-3). (B) PsAvh281 взаимодействует с NbSNAP-1, NbSNAP-2 и NbSNAP-3 in vivo . Взаимодействие между GmSNAP-1 и PsAvh281 использовали в качестве положительного контроля. Суммарные белки экстрагировали из N . benthamiana , ко-иммунопреципитация с агаровыми шариками GFP-Trap_A и обнаруженная вестерн-блоттингом с использованием антител против GFP и против HA.
10.1371/journal.ppat.1010104.s010
(TIF)
S11 Рис. Мутанты PsAvh281 не могут влиять на взаимодействие между GmSNAP и GmNSF.
(A) PsAvh281, но не мутанты PsAvh281-M1 или PsAvh281-M2, могут нарушать взаимодействие между GmSNAP-1 и GmNSF in vivo . GFP-GmSNAP-1 и GmNSF-HA были сверхэкспрессированы с PsAvh281-RFP или PsAvh281-M1/2-RFP в N . бентамиана . Суммарные белки экстрагировали из N . benthamiana , совместно иммунопреципитированного с агаровыми шариками GFP-Trap_A и обнаруженного с помощью вестерн-блоттинга с использованием антител против GFP, против HA и против RFP. (B) PsAvh281, но не мутанты PsAvh281-M1 или PsAvh281-M2, могут нарушать взаимодействие между GmSNAP и GmNSF in vitro .His-GmSNAP-1, GST-GmNSF, MBP-PsAvh281, MBP-PsAvh281-M1, MBP-PsAvh281-M2 и MBP экспрессировались в E . кишечная палочка . Белки очищены от E . coli инкубировали с агарозой Ni-NTA и определяли вестерн-блоттингом с использованием антител против His, против GST и против MBP. (C) MBP-PsAvh281 MBP-PsAvh281-M1, MBP-PsAvh281-M2 не могут связываться с His-колонкой. His-GmSNAP-1, MBP-PsAvh281, MBP-PsAvh281-M1 и MBP-PsAvh281-M2 экспрессировались в E . кишечная палочка .Белки очищены от E . coli инкубировали с агарозой Ni-NTA и определяли вестерн-блоттингом с использованием анти-His и анти-MBP антител.
10.1371/journal.ppat.1010104.s011
(TIF)
S12 Рис. Мутант GmSNAP-M3 не взаимодействует с GmNSF и не способствует устойчивости растений.
(A) GmNSF-HA коэкспрессировался с GFP, GmSNAP-1 или GmSNAP-M3 в N . бентамиана . Белки ко-иммунопреципитировали с помощью гранул GFP-Trap_A, а ко-преципитацию GmSNAP-1-HA определяли с помощью вестерн-блоттинга с использованием антител против HA.(B) PsAvh281-HA коэкспрессировался с GFP, GmSNAP или GmSNAP M3 в N . бентамиана . Белки ко-иммунопреципитировали с помощью гранул GFP-Trap_A, а копреципитацию GmSNAP-HA определяли вестерн-блоттингом с использованием антител против GFP и против HA. (C – F) Анализы инфекции Phytophthora capsici на N . Листья benthamiana , экспрессирующие GFP-GmSNAP-1, GFP-GmSNAP-M3 или GFP (отрицательный контроль). Р . стручковых перцев инокулировали через 48 ч после агроинфильтрации.Поражения фотографировали через 48 ч после инокуляции. Диаметр поражения (E) и относительную биомассу Phytophthora (F) определяли количественно через 48 ч после инокуляции. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для пяти повторов. Разные буквы обозначают статистически значимые различия ( P < 0,01; однофакторный дисперсионный анализ).
10.1371/journal.ppat.1010104.s012
(TIF)
S13 Рис. Секреция GmGIP1, P69B и PR1 зависит от SNAP.
Субклеточная локализация GmGIP1-GFP, P69B-GFP, PR1-GFP и GmAP1-GFP была исследована при экспрессии в TRV:: SNAPs -обработанные или обработанные EV N . бентамиана . Образцы инфильтрата собирали через 48 ч после агроинфильтрации с помощью конфокальной микроскопии. Каждое изображение конфокальной микроскопии представляет собой стопку из 16–30 одиночных срезов. Масштабная линейка, 20 мкм.
10.1371/journal.ppat.1010104.s013
(TIF)
S14 Рис. Мутанты PsAvh281 не могут ингибировать секрецию GmGIP1, P69B или PR1.
(A–C) Исследована субклеточная локализация GmGIP1-GFP, P69B-GFP или PR1-GFP при совместной экспрессии с пустым вектором (EV), PsAvh281-HA, PsAvh281-M1-HA и PsAvh281-M2-HA 48 ч после агроинфильтрации с помощью конфокальной микроскопии. Каждое изображение конфокальной микроскопии представляет собой стопку из 16–30 одиночных срезов. Масштабная линейка, 20 мкм. (D-F) GmGIP1-HA, P69B-HA или PR1-HA коэкспрессировались с GFP-PsAvh281, GFP-PsAvh281-M1 или GFP-PsAvh281-M2 в N . бентамиана . Апопластную жидкость выделяли через 48 ч после агроинфильтрации. Указанные белки в апопластной жидкости и межклеточных экстрактах выявляли методом вестерн-блоттинга с использованием антител анти-GFP и анти-HA. Цифры под пятном указывают относительное содержание GmGIP1-HA, P69B-HA или PR1-HA.
10.1371/journal.ppat.1010104.s014
(TIF)
S15 Рис. Локализация PsAvh281 в плазматической мембране не зависит от его взаимодействия с SNAP.
Субклеточная локализация GFP-PsAvh281 в TRV:: SNAPs N . бентамиана . GFP-PsAvh281 коэкспрессировался с реморином-RFP, который действует как маркер локализации плазматической мембраны в TRV:: SNAPs N . бентамиана . Флуоресценцию клеток эпидермиса в инфильтрированных листьях наблюдали с помощью конфокальной микроскопии через 48 ч после агроинфильтрации. Шкала баров, 20 мкм. Статистический анализ флуоресценции GFP-PsAvh281 с реморином-RFP на срезах мембраны (белые стрелки). ось Y, относительная интенсивность флуоресценции GFP или RFP; ось x, длина трансекты (мкм).
10.1371/journal.ppat.1010104.s015
(TIF)
Благодарности
Мы благодарим профессора Бретта Тайлера (Университет штата Орегон) и профессора Венбо Ма (Калифорнийский университет, Риверсайд) за полезные предложения. Мы благодарны профессору Софиен Камун (Лаборатория Сейнсбери), который любезно предоставил векторы P69B-HA.
Каталожные номера

1. Ван И, Ван И, Ван И. Апопластные протеазы: мощное оружие против патогенных инфекций растений. Заводские коммуникации. 2020;1(4). пмид:33367249; Центральный PMCID в PubMed: PMC7748006.
2. Ван Д., Уивер Н.Д., Кесарвани М., Донг. X. Индукция белкового секреторного пути необходима для системной приобретенной резистентности. Наука. 2005;308 (5724):5. пмид: 158
.

3. Хорда Л., Коэго А., Конехеро В., Вера П.Геномный кластер, содержащий четыре дифференциально регулируемых субтилизиновых гена процессинговых протеаз, находится в растениях томата. Дж. Биол. Хим. 1999;274:6. пмид:98.
4. Ван С., Син Р., Ван И, Шу Х., Фу С., Хуан Дж. и др. Расщепление апопластного белка патогена растительными субтилазами активирует иммунитет хозяина. Новый Фитол. 2020. Эпублик 2020/12/01. пмид:33251609.
5. Бозкурт Т.О., Шорнак С., Вин Дж., Шиндо Т., Ильяс М., Олива Р. и др. Phytophthora infestans эффектор AVRblb2 предотвращает секрецию растительной иммунной протеазы на гаусториальном интерфейсе.Proc Natl Acad Sci U S A. 2011;108(51):20832–7. Эпб 2011/12/07. пмид: 22143776; Центральный PMCID в PubMed: PMC3251060.
6. Ma Z, Song T, Zhu L, Ye W, Wang Y, Shao Y и др. Белок Phytophthora sojae Glycoside Hydrolase 12 является основным фактором вирулентности при заражении сои и признан PAMP. Растительная клетка. 2015;27(7):2057–72. Эпб 2015/07/15. пмид: 26163574; Центральный PMCID в PubMed: PMC4531360.
7. Ma Z, Zhu L, Song T, Wang Y, Zhang Q, Xia Y и др.Паралогичная приманка защищает Phytophthora sojae апопластный эффектор PsXEG1 от ингибитора-хозяина. Наука. 2017;355(6326):710–4. Эпб 2017/01/14. пмид: 28082413.
8. Го Б., Ван Х., Ян Б., Цзян В., Цзин М., Ли Х и др. Phytophthora sojae Эффектор PsAvh340 ингибирует секрецию аспарагиновой протеазы хозяина, способствуя развитию инфекции. Мол завод. 2019;12(4):552–64. Эпублик от 01.02.2019. пмид:30703565.
9. Xia Y, Suzuki H, Borevitz J, Blount J, Guo Z, Patel K, et al.Внеклеточная аспарагиновая протеаза участвует в передаче сигналов устойчивости к болезням арабидопсиса. EMBO J. 2004;23(4):980–8. Эпб 2004/02/07. пмид:14765119; Центральный PMCID в PubMed: PMC380998.
10. Гу Ю., Завалиев Р., Донг Х. Торговля мембранами в иммунитете растений. Мол завод. 2017;10(8):1026–34. Эпаб 13.07.2017. пмид: 28698057; Центральный PMCID в PubMed: PMC5673114.
11. Ян Р., Шеллер Р.Х. SNARE — двигатели для синтеза мембран. Nat Rev Mol Cell Biol. 2006;7(9):631–43.Эпб 2006/08/17. пмид: 164.
12. Бонифачино Дж. С., Глик Б. С. Механизмы почкования и слияния пузырьков. Клетка. 2004; 116:14. пмид: 14744428.
13. Брюнгер АТ. Структура и функция SNARE и SNARE-взаимодействующих белков. Q Rev Biophys. 2005;38(1):1–47. Эпублик 13.12.2005. пмид: 16336742.
14. Коллинз Н.К., Тордал-Кристенсен Х., Фолькер Липка, Бау С., Комбринк Э., Цю Дж.-Л. и др. Опосредованная белком SNARE устойчивость к болезням клеточной стенки растений.Природа. 2003;425:5. пмид: 12955104.
15. Вик П., Гансель Х., Оулеви С., Пейдж В., Студер И., Дерст М. и др. Экспрессия t-SNARE AtSNAP33 индуцируется патогенами и механической стимуляцией. Завод Физиол. 2003;132(1):343–51. Эпб 2003/05/15. пмид:12746539; Центральный PMCID в PubMed: PMC166979.
16. Моника Калде TSNh Ким Финдли и Пек Скотт С. Синтаксин SYP132 способствует устойчивости растений к бактериям и секреции белка 1, связанного с патогенезом.Proc Natl Acad Sci U S A. 2007; 104:6. пмид: 175; Центральный PMCID в PubMed: PMC14.
17. Cao WL, Yu Y, Li MY, Luo J, Wang RS, Tang HJ, et al. OsSYP121 накапливается в местах проникновения грибов и опосредует устойчивость хозяина к рисовой пирикуляриозу. Завод Физиол. 2019;179(4):1330–42. Эпб 2019/01/09. пмид:30617050; Центральный PMCID в PubMed: PMC6446747.
18. Юн Х.С., Квон С. Торговля везикул в иммунитете растений. Curr Opin Plant Biol. 2017;40:34–42. Эпб 2017/07/25.пмид: 28735164.
19. Ван И, Тайлер Б.М., Ван Ю. Защита и контрзащита при заражении растений патогенными оомицетами. Анну Рев Микробиол. 2019;73:667–96. Эпаб 2019/06/22. пмид:31226025.
20. Джонс Дж.Д., Дангл Дж.Л. Иммунная система растений. Природа. 2006;444(7117):323–9. Эпублик 17.11.2006. пмид: 17108957.
21. Доу Д, Чжоу Дж. М. Фитопатоген эффекторов, подрывающих иммунитет хозяина: разные враги, одинаковое поле боя. Клеточный микроб-хозяин.2012;12(4):484–95. Эпублик 23.10.2012. пмид: 23084917.
22. Дангл Д.Л., Хорват Д.М., Стаскавич Б.Дж. Поворот иммунной системы растений от вскрытия к развертыванию. Наука. 2013;341 (6147):6. пмид: 23950531; Центральный PMCID в PubMed: PMC3869199.
23. Доу Д., Кале С.Д., Ван С., Цзян Р.Х., Брюс Н.А., Арредондо Ф.Д. и др. Опосредованное RXLR проникновение эффектора Avr1b Phytophthora sojae в клетки сои не требует механизма, кодируемого патогеном. Растительная клетка.2008;20(7):1930–47. Эпб 2008/07/16. пмид: 18621946; Центральный идентификатор PMC в PubMed: PMC2518231.
24. Цзян РАЙ, Трипати С., Говерс Ф., Тайлер Б.М. В эффекторном резервуаре RXLR у двух видов Phytophthora доминирует одно быстро развивающееся надсемейство, насчитывающее более 700 членов. Proc Natl Acad Sci U S A. 2008; 105:6. Epub 14 марта. pmid:18344324; Центральный PMCID в PubMed: PMC22.
25. Du Y, Mpina MH, Birch PR, Bouwmeester K, Govers F. Phytophthora infestans RXLR Эффектор AVR1 взаимодействует с экзоцистным компонентом Sec5 для управления иммунитетом растений.Завод Физиол. 2015; 169(3):1975–90. Эпб 2015/09/04. пмид: 26336092; Центральный PMCID в PubMed: PMC4634092.
26. Speth EB, Imboden L, Hauck P, He SY. Субклеточная локализация и функциональный анализ GTPase RabE Arabidopsis . Завод Физиол. 2009;149(4):1824–37. Эпб 2009/02/24. пмид: 19233904; Центральный PMCID в PubMed: PMC2663744.
27. Tomczynska I, Stumpe M, Mauch F. Консервативный эффектор RxLR взаимодействует с GTPases RABA-типа хозяина, чтобы ингибировать опосредованную везикулами секрецию противомикробных белков. Плант Дж. 2018;95(2):187–203. Эпублик от 20.04.2018. пмид: 29671919.
28. Петре Б., Контрерас М.П., Бозкурт Т.О., Шаттат М.Х., Скленар Дж., Шорнак С. и др. Скрининг белков Phytophthora infestans RXLR «хозяин-взаимодействующий» выявляет перенос везикул как основной процесс, нацеленный на эффектор. Растительная клетка. 2021. Эпублик 2021/03/08. пмид:33677602
29. Тайлер Б.М., Трипати С., Чжан С., Дехал П., Цзян Р.И., Аэртс А. и др. Последовательности генома Phytophthora раскрывают эволюционное происхождение и механизмы патогенеза.Наука. 2006;313 (5791):6. Центральный PMCID в PubMed: PMC16946064. пмид:16946064
30. Wang Q, Han C, Ferreira AO, Yu X, Ye W, Tripathy S, et al. Транскрипционное программирование и функциональные взаимодействия в эффекторном репертуаре Phytophthora sojae RXLR. Растительная клетка. 2011;23(6):2064–86. Эпублик 2011/06/10. пмид: 21653195; Центральный PMCID в PubMed: PMC3160037.
31. Ян Б., Ян С., Го Б., Ван И, Чжэн В., Тянь М. и др. Эффектор Avh341 Phytophthora взаимодействует с NDR1-подобными белками хозяина, чтобы управлять иммунитетом растений.J Integr Plant Biol. 2021. Эпублик 2021/02/16. пмид:33586843.
32. Верена Бартецко С.С., Фогель Флориан, Хартнер Кристина, Стадлер Рут, Хаммес Ульрих З. и Бёрнке Фредерик. Xanthomonas campestris pv. vesicatoria Эффекторный белок XopJ типа III ингибирует секрецию белка: доказательства влияния на защитные реакции, связанные с клеточной стенкой. Мол. Взаимодействие растительных микробов. 2009;22:10. пмид: 19445590.
33. Raffaele S, Bayer E, Lafarge D, Cluzet S, German Retana S, Boubekeur T, et al.Реморин, белок пасленовых, находящийся в мембранных рафтах и плазмодесмах, нарушает перемещение Х-вируса картофеля. Растительная клетка. 2009;21(5):1541–55. Эпб 2009/05/28. пмид: 19470590; Центральный PMCID в PubMed: PMC2700541.
34. Бозкурт Т.О., Ричардсон А., Дагдас Ю.Ф., Монгранд С., Камун С., Раффаэле С. Реморин1.3, связанный с растительной мембраной, накапливается в дискретных перигаустериальных доменах и повышает восприимчивость к Phytophthora infestans . Завод Физиол. 2014;165(3):1005–18.Эпб 2014/05/09. пмид: 24808104; Центральный PMCID в PubMed: PMC4081318.
35. Takemoto K, Ebine K, Askani JC, Kruger F, Gonzalez ZA, Ito E, et al. Различные наборы связывающих комплексов, комплексов SNARE и Rab GTPases обеспечивают слияние мембран в вакуоли у Arabidopsis . Proc Natl Acad Sci U S A. 2018;115(10):E2457–E66. Эпаб 2018/02/22. пмид: 29463724; Центральный PMCID в PubMed: PMC5877921.
36. Чжао М., Ву С., Чжоу Ц., Вивона С., Сиприано Д.Дж., Ченг И. и др.Механистические взгляды на перерабатывающую машину комплекса SNARE. Природа. 2015;518(7537):61–7. Эпб 13.01.2015. пмид: 25581794; Центральный PMCID в PubMed: PMC4320033.
37. Zhou Q, Lai Y, Bacaj T, Zhao M, Любимов AY, Uervirojnangkoorn M, et al. Архитектура механизма синаптотагмин-SNARE для экзоцитоза нейронов. Природа. 2015;525(7567):62–7. Эпб 2015/08/19. пмид: 26280336; Центральный PMCID в PubMed: PMC4607316.
38. Zhou Q, Zhou P, Wang AL, Wu D, Zhao M, Sudhof TC, et al.Примированный комплекс SNARE-комплексин-синаптотагмин для экзоцитоза нейронов. Природа. 2017;548(7668):420–5. Эпб 2017/08/17. пмид: 28813412; Центральный PMCID в PubMed: PMC5757840.
39. Брогден К.А. Антимикробные пептиды: порообразователи или ингибиторы метаболизма у бактерий? Nat Rev Microbiol. 2005;3(3):238–50. Эпублик 11.02.2005. пмид: 15703760.
40. Лай Ю, Галло Р.Л. Усиление иммунитета: как антимикробные пептиды играют множественную роль в иммунной защите. Тренды Иммунол.2009;30(3):131–41. Эпб 2009/02/17. пмид: 1
24; Центральный PMCID в PubMed: PMC2765035.
41. Хаас Б.Дж., Камун С., Зоди М. К., Цзян Р.Х., Хэндсакер Р.Е., Кано Л.М. и др. Последовательность генома и анализ возбудителя ирландского картофельного голода Phytophthora infestans . Природа. 2009;461(7262):393–8. Эпублик 11.09.2009. пмид: 19741609.
42. Кале С.Д., Гу Б., Капеллуто Д.Г., Доу Д., Фельдман Э., Румор А. и др. Внешний липид PI3P опосредует проникновение эффекторов эукариотических патогенов в клетки-хозяева растений и животных.Клетка. 2010;142(2):284–95. Эпублик 27.07.2010. пмид: 20655469.
43. Лахссаси Н., Пия С., Бекал С., Лю С., Чжоу З., Бергуниу С. и др. Связанный с патогенезом белок GmPR08-Bet VI способствует молекулярному взаимодействию между GmSHMT08 и GmSNAP18 при устойчивости к глицинам Heterodera . Plant Biotechnol J. 2020;18(8):1810–29. Эпаб 2020/01/22. пмид:31960590; Центральный PMCID в PubMed: PMC7336373.
44. Чой И, Ким С, Квон С, Юн ХС. Регуляция клеточного содержания VAMP721/722 у арабидопсиса . Поведение сигналов растений. 2019;14(9):e1632690. Эпаб 2019/06/21. пмид:31216950; Центральный PMCID в PubMed: PMC6768181.
45. Бэйлесс А.М., Смит Дж.М., Сонг Дж., Макминн П.Х., Тейе А., Август Б.К. и др. Устойчивость к болезням за счет нарушения взаимодействия альфа-SNAP-NSF и переноса везикул соей Rhg1. Proc Natl Acad Sci U S A. 2016;113(47):E7375–E82. Эпублик 2016/11/09. пмид: 27821740; Центральный PMCID в PubMed: PMC5127302.
46. Фанг Ю, Тайлер БМ. Эффективное разрушение и замена эффекторного гена у оомицета Phytophthora sojae с использованием CRISPR/Cas9.Мол Плант Патол. 2016;17(1):127–39. Эпублик 2015/10/29. пмид: 26507366; Центральный PMCID в PubMed: PMC6638440.
47. Hua C, Wang Y, Zheng X, Dou D, Zhang Z, Govers F, et al. Альфа-субъединица G-белка Phytophthora sojae участвует в хемотаксисе с изофлавонами сои. Эукариотическая клетка. 2008;7(12):2133–40. Эпублик 22.10.2008. пмид: 18931042; Центральный PMCID в PubMed: PMC2593195.

Фото бесплатно для дизайнеров

Pikist — Фото бесплатно для дизайнеров
Роялти-фри фотографии выпущены под лицензией общественного достояния
Текстура, стена, фонд, желтый, коричневый, картинки, абстрактный узор Всеобщее достояние
фильм, катушка, проектор, фильм, кино, развлечение, ретро, винтаж, кинематография, диафильм, театр Всеобщее достояние
георгин, завод, цветок, цвести, цветение, природа, лепестки, крупным планом, лето, флора, красота Всеобщее достояние
парк, мама, девочка, мама, ребенок, малыш, пейзаж, дерево, беременная, семья, веселье Всеобщее достояние
org/ImageObject»> церковь, санторини, д, греция, остров, греческий, архитектура, пейзаж, ия, киклады, здание Всеобщее достояние
наручные часы, карман, рука, время, мужчина, бизнес, смотреть, бизнесмен, мода, элегантный, аксессуар Всеобщее достояние
спортсмены, американский футбол, игроки, команда, мяч, поле, футбол, футболисты, игра, трава, шлемы Всеобщее достояние
собака, сука, бернский зенненхунд, глаза, животное, домашнее животное, чистокровная собака, милая, защитник, приют для животных, смотреть Всеобщее достояние
печатная форма, буквы, шрифт, тип, дизайн, алфавит, символ, азбука, печать, персонаж, текстура Всеобщее достояние
org/ImageObject»> лампочка, осветительные приборы, легкий, текущий, энергия, пылающий, зеркальное отображение, электрический, луковицы Всеобщее достояние
пустыня, Марокко, дюны, песок, пейзаж, песчаные дюны, природа, сахар, африка, путешествия, горячие Всеобщее достояние
насекомые, стрекоза, депрессия, макро, крылья, хитин Всеобщее достояние
фантастика, научная фантастика, пейзаж, вперед, космический корабль, составление, плавать, летающий, монтаж, осветительные приборы, мистический Всеобщее достояние
стол, дерево, свежий, органический, здоровый, еда, овощной, деревянный, помидор, фон, приготовление пищи Всеобщее достояние
org/ImageObject»> гора, горы, снег, зима, месяц, полнолуние, млечный путь Всеобщее достояние
плакат, стена, макет, интерьер, рамка, шаблон, стол, презентация, пустой, пространство, портрет Всеобщее достояние
вселенная, небо, звезда, пространство, космос, заголовок, галактика, баннер, астрономия, созвездие, немного Всеобщее достояние
птица, зимородок, природа, дикая природа, синий, пернатый, маленький Всеобщее достояние
фэнтези, собака, эльф, спираль, сочинение, сказка, сюрреалистичный, женский пол, мистический, арт, оранжевый Всеобщее достояние
org/ImageObject»> драконий фрукт, фрукты, экзотические, тропические, свежие, натуральные, полезные Всеобщее достояние
хижина, свайная конструкция, дерево, рыбацкая изба, отдых, оздоровление, ведьмин дом, сказочный лес, рыба, рыбалка, биотоп Всеобщее достояние
огонь, горящий, горячий, высокая температура, костровая яма, пламя, сдержанный, пылать Всеобщее достояние
цифры, профессии, работа, прикол, веселье, карьера, работа, риэлторы, бизнесмен, сантехник, художник Всеобщее достояние
замок, дверь, заперта, закрытая, защищенная, замок, деревянная, зеленая, цепь, сталь, звенья Всеобщее достояние
org/ImageObject»> люди, темный, портрет, женщина, взрослый, меланин, Африканский Всеобщее достояние
Кадьяк бурый медведь, рыбалка, вода, постоянный, дикая природа, природа, хищник, портрет, рыба, пустыня, коричневый Всеобщее достояние
спальня, кровать, кровать с балдахином, рисовая кровать, покрывало, подушки, накидки, твердая древесина, пол из красного дуба, кресло чиппендейл, интерьер Всеобщее достояние
perentie, ящерица, варан, рептилия, варанус, живая природа, австралия Всеобщее достояние
Пристань, Пирс, дерево, вода, море, природа, лето, океан, деревянные, пляж, платформа Всеобщее достояние
org/ImageObject»> женский портрет, крупный план, макияж, девушка, глаза, лицо, губы, модель, девушки, счастливые глаза, взгляд Всеобщее достояние
пиво, цветы, тюльпаны, весна, пастельные тона, розовый, желтый, эль, горький, мягкий, пенный Всеобщее достояние
розы, роза, розовый, цветы, книга, красота, любовь, романтика, природа, читать, романтика Всеобщее достояние
женщина, живопись, битник, шляпа, красота, сцена, девушка, поле Всеобщее достояние
фукс, молодой лис, дикое животное, лисенок Всеобщее достояние
клюква, коктейль, ягода, фрукты, напиток, органические, здоровые, смешанные, сок, свежий, еда Всеобщее достояние
org/ImageObject»> роза, букет роз, букет, цветы, поздравление, свадьба, цветение розы, букет невесты, день рождения, праздник, купон Всеобщее достояние
беременная, живот, мать, материнство, женщина, женщина, ребенок, семья, ребенок, круглый, тело Всеобщее достояние
вино, красный, ужин, отель, праздник, праздник, счастливый, стекло, крупным планом Всеобщее достояние
канюк, харрис ястреб, раптор, дикая птица, хищная птица, клюв, птица, животный мир Всеобщее достояние
задний план, Абстрактные, граффити, Гранж, уличное искусство, Стена для граффити, Искусство граффити, Художественный, Окрашенный, Балончик с краской, Изобразительное искусство Всеобщее достояние
org/ImageObject»> Коза, козел, животных, природы, млекопитающих, портрет, рога Всеобщее достояние
акции, шоппинг, город, фон, азиатка, красочный, конфеты, вредная еда, еда, яйца, индия Всеобщее достояние
ручей, лес, пейзаж, деревья, природа, живописный, зеленый, собачьи бега, гранада Всеобщее достояние
животное, морской лев, молодое животное, молодой морской лев, любовь, целоваться, млекопитающее Всеобщее достояние
берберские обезьяны, варварская обезьяна, поцелуй, мать и дитя, молодые, привязанность, любовь Всеобщее достояние
цветок, цветочные, цвести, природа, весна, лето, цветение, лист, завод, Лепесток, зеленый Всеобщее достояние
org/ImageObject»> мак, маки, klatschmohn, цветы, цвести, цветение, луг, красный, природа, цветок мака Всеобщее достояние
железная дорога, рельсы, трек, железная дорога, транспорт, путешествия, старый, исторический, трафик, мост, лес Всеобщее достояние
дети, картина, лицо, лицевой, чернила, вечеринка, радость, щетка, улыбка, Джонаскакарото, веселая Всеобщее достояние
черника, завтрак, мюсли, здоровые, витамины, фрукты, вкусные, питание, фруктовый салат, фрукты, питание Всеобщее достояние
ребенок, девочка, вне, играть, панч, панч и джуди, детство, лето, разноцветный, сад, в саду Всеобщее достояние
org/ImageObject»> книга, читать, Библия, литература, учиться, знание, образование, исследование, страницы, бумага, информация Всеобщее достояние
красивый дом, сад, стиль новой англии, ландшафтный дизайн, садоводство, современный, солнечный, дом, роскошный внешний вид дома, внешний вид дома, современный внешний вид дома Всеобщее достояние
Сидней, Австралия, залив, гавань, море, океан, волны, маяк, ориентир, исторический, притяжение Всеобщее достояние
Огонь, пламя, дым, дерево, сжигать, высокая температура, горячий, свет, свечение, угли, оранжевый Всеобщее достояние
венеция, италия, канал, здания, город, закат, площадь сан-марко, вода, венеция, путешествия, европа Всеобщее достояние
org/ImageObject»> iphone, 4s, технологии, мобильный, приложение, устройство, экран, гаджет, мобильный телефон, смартфон Всеобщее достояние
горы, долина, река, природа, пейзаж, живописный, идиллический, облака, небо, деревья, дикая природа Всеобщее достояние
барселона, достопримечательности, европа, испания, путешествия, город, каталония, туризм, европейский, городской, испанский Всеобщее достояние
волк, волки, европейский волк, плотоядные, хищник, вьючное животное, волчанка Всеобщее достояние
Загрузить еще
Фототераностические агенты, полученные из эритроцитов: гибридные нановезикулы, содержащие индоцианин зеленый, для визуализации в ближнем инфракрасном диапазоне и терапевтических применений
Pansare, V. J., Hejazi, S., Faenza, WJ & Prud’homme, RK. Обзор длинноволновых оптических и NIR материалов для визуализации: контрастные агенты, флуорофоры и многофункциональные наноносители. хим. Матер. 13, 812–827 (2012).
Артикул Google Scholar
Fox, J. J. & Wood, E. H. Применение кривых разведения, снятых с правой стороны сердца или венозного кровообращения с помощью нового индикаторного красителя. проц. Мэйо Клин. 32, 541 (1957).
КАС Google Scholar
Цезарь Дж., Шелдон С., Чандусс Л., Гевара Л. и Шерлок С. Использование индоцианина зеленого для измерения печеночного кровотока и в качестве теста на функцию печени. клин. науч. 21, 43–57 (1961).
КАС пабмед Google Scholar
Yannuzzi, L. A. Индоцианиновая зеленая ангиография: перспектива использования в клинических условиях.Являюсь. Дж. Офтальмол. 151, 745–751 (2011).
Артикул Google Scholar
Ван дер Ворст, Дж. Р. и др. Оптимизация дозы для флуоресцентного картирования сигнальных лимфатических узлов в ближнем инфракрасном диапазоне у пациентов с меланомой. бр. Дж. Дерматол. 168, 93–98 (2013).
КАС Статья Google Scholar
Jeschke, S. et al. Визуализация путей лимфатических узлов в режиме реального времени с помощью лапароскопической радиоизотопной и флуоресцентной диссекции сигнальных лимфатических узлов при стадировании рака предстательной железы.Урология 80, 1080–1086 (2012).
Артикул Google Scholar
Crane, L.M. et al. Интраоперационная флуоресцентная визуализация в ближнем инфракрасном диапазоне для обнаружения сигнальных лимфатических узлов при раке вульвы: первые клинические результаты. Гинекол. Онкол. 120, 291–295 (2011).
КАС Статья Google Scholar
Севик-Мурака, Э. М. и др. Визуализация лимфотока у больных раком молочной железы после введения микродоз флуорофора ближнего инфракрасного диапазона: технико-экономическое обоснование.Радиология 246, 731–741 (2008).
Артикул Google Scholar
Смретшниг, Э. и др. Полуфлюенсная фотодинамическая терапия при хронической центральной серозной хориоретинопатии. Сетчатка 33, 316–323 (2013).
КАС Статья Google Scholar
Yannuzzi, L.A. et al. Индоцианиновая зеленая фотодинамическая терапия под контролем ангиографии для лечения хронической центральной серозной хориоретинопатии: пилотное исследование.2003. Приложение для сетчатки. 1, 288–298 (2012).
Артикул Google Scholar
Коста, Р. А. и др. Индоцианиновый зеленый фототромбоз как новый метод лечения персистирующей центральной серозной хориоретинопатии. Курс. Глаз Res. 25, 287–297 (2002).
Артикул Google Scholar
Клейн А. и др. Индоцианиновый зеленый диодный лазер для лечения винных пятен: клинические и гистологические доказательства нового варианта лечения из рандомизированного контролируемого исследования.бр. Дж. Дерматол. 167, 333–342 (2012).
КАС Статья Google Scholar
Liggett, P.E., Lavaque, A.J., Chaudhry, N.A., Jablon, E.P. & Quiroz-Mercado, H. Предварительные результаты комбинированной одновременной транспупиллярной термотерапии и фотодинамической терапии на основе ICG для хориоидальной меланомы. Офтальм. Surg. Lasers Imaging 36, 463–470 (2005).
Артикул Google Scholar
Ясин М.А., Ю, Дж., Вонг, М.С. и Анвари, Б. Флуоресцентная визуализация органов млекопитающих in vivo с использованием конструкций мезокапсул с собранным зарядом, содержащих индоцианин зеленый. Опц. Экспресс 16, 20577–20587 (2008).
ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google Scholar
Бахмани, Б. и др. Влияние наноинкапсуляции и ПЭГилирования на биораспределение индоцианина зеленого у здоровых мышей: количественная флуоресцентная визуализация и анализ органов.Междунар. Дж. Наномед. 8, 1609–1620 (2013).
Google Scholar
Юнг, Б., Рао, А. Л. и Анвари, Б. Оптические наноконструкции, состоящие из вируса мозаики костра с истощенным геномом, легированного хромофором ближнего инфракрасного диапазона, для потенциальных биомедицинских применений. ACS Nano 22, 1243–1252 (2011).
Артикул Google Scholar
Гупта, С. и др. Наноконструкции, имитирующие вирусы, в качестве контрастного вещества для фотоакустической визуализации в ближнем инфракрасном диапазоне.Наномасштаб 5, 1772–1776 (2013).
ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google Scholar
Пьеридж Ф., Серафини С., Росси Л. и Маньяни М. Доставка лекарств на основе клеток. Доп. Наркотик Делив. Ред. 160, 286–295 (2008).
Артикул Google Scholar
Музыкантов В.Р. Доставка лекарств эритроцитами: сосудистые переносчики, созданные матушкой-природой. Эксперт. мнение Наркотик Делив.7, 403–427 (2010).
КАС Статья Google Scholar
Гутьеррес Миллан, К., Колино Гандарильяс, К.И., Саялеро Маринеро, М.Л. и Ланао, Х.М. Платформы для доставки лекарств на основе клеток. тер. Делив. 3, 25–41 (2012).
Артикул Google Scholar
Hu, C.M., Fang, R.H. & Zhang, L. Системы доставки на основе эритроцитов. Доп. Здоровьеc. Матер. 5, 532–547 (2012).
Google Scholar
Брахлер, М. и др. Эритроциты-носители, нагруженные магнетитом, как контрастные вещества для магнитно-резонансной томографии. Нано Летт. 6, 2505–2509 (2006).
ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google Scholar
Чанг, М. и др. Гомологичные везикулы, полученные из эритроцитов, как сверхмалые носители оксида железа для магнитно-резонансной томографии стволовых клеток. Нанотехнологии 21, 235103 (2010).
ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья Google Scholar
Антонелли А., Сфара К., Мануали Э., Брюс И. Дж. и Маньяни М. Инкапсуляция суперпарамагнитных наночастиц в эритроциты в качестве новых носителей контрастных веществ для МРТ. Наномедицина (Лондон) 6, 211–223 (2011).
КАС Статья Google Scholar
Ан, С., Юнг, С. Ю., Сео, Э. и Ли, С. Дж. Красные кровяные тельца человека (эритроциты), содержащие золотые наночастицы, для рентгеновской динамической визуализации.Биоматериалы 32, 7191–7199 (2011).
КАС Статья Google Scholar
Миланик, М. А., Риттер, С. и Мейснер, К. Разработка эритроцитов как эритросенсоров: первые шаги. Клетки крови Мол. Дис. 47, 100–106 (2011).
КАС Статья Google Scholar
Ritter, S.C., Milanic, M.A. & Meissner, K.E. Инкапсуляция FITC для мониторинга внеклеточного рН: шаг к развитию эритроцитов в качестве биосенсоров аналитов циркулирующей крови.Биомед. Опц. Экспресс 2, 2012–2021 (2011).
Артикул Google Scholar
Флауэр, Р. и др. Наблюдение за динамикой эритроцитов в капиллярах сетчатки и хориокапиллярах с использованием клеток-призраков эритроцитов, нагруженных ICG. Вкладывать деньги. Офтальмол. Вис. науч. 49, 5510–5516 (2008).
Артикул Google Scholar
Филип Р., Пенцкофер А., Баумлер В., Сеймиес Р.М. и Абельс, К. Спектроскопическое исследование поглощения и флуоресценции индоцианина зеленого. Дж. Фотох. Фотобио. А 96, 137–148 (1996).
КАС Статья Google Scholar
Каша М., Ролз Х. Р. и Ашраф Эль-Баюми М. Экситонная модель в молекулярной спектроскопии. Чистое приложение хим. 11, 371–392 (1965).
КАС Статья Google Scholar
Хольцер В.и другие. Фотостабильность и термостабильность индоцианинового зеленого. Дж. Фотохим. Фотобиол. Б. 47, 155–164 (1998).
КАС Статья Google Scholar
Ху, К.-М. Дж. и др. Камуфлированные полимерные наночастицы эритроцитов как биомиметическая платформа доставки. проц. Натл. акад. науч. США 108, 10980–10985 (2011).
ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google Scholar
Доменек, К.и другие. Нагруженные L-аспарагиназой эритроциты при рефрактерном или рецидивирующем остром лимфобластном лейкозе у детей и взрослых: результаты рандомизированного исследования GRASPALL 2005-01. бр. Дж. Гематол. 153, 58–65 (2010).
Артикул Google Scholar
Босса, Ф. и др. Опосредованная эритроцитами доставка дексаметазона у пациентов с язвенным колитом легкой и средней степени тяжести, рефрактерным к месаламину: рандомизированное контролируемое исследование. Являюсь. Дж.Гастроэнтерол. 103, 2509–2516 (2008).
ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google Scholar
Пер, Д. и др. Наноносители как новая платформа для терапии рака. Нац. нанотехнологии. 12, 751–760 (2007).
ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья Google Scholar
Как принести цветы в дом этой осенью
Цветы способны *задавать* настроение во многих отношениях.В пышные парки они привносят яркие всплески цвета. На оживленные городские улицы они несут радость проворным пассажирам, а в дом – тепло. Хотя их способность поднимать настроение не зависит от времени года, мы часто ограничиваем их время только весной и летом. Но есть что-то интригующее и красивое в цветах, распускающихся осенью. Яркие, но землистые оттенки красного, мягкого апельсина и золотисто-желтого придают обстановке ощущение душевности и домашнего уюта — и именно так мы хотим, чтобы наш дом ощущался в морозные осенние дни.
В то время как мы все можем засвидетельствовать прекрасное чувство аккуратной обрезки наших букетов из продуктового магазина и правильного размещения их в вазе, требуется художественный взгляд и мысль, чтобы создать изысканную цветочную композицию. Знакомьтесь с Карлой Смит-Браун, флористом и основателем дизайн-студии Olivee Floral. Вы можете узнать ее привлекательные аранжировки по недавним коллаборациям студии с такими брендами, как Dior Beauty или Kate Spade, или даже просто по быстрой прокрутке в Instagram. И после нескольких лет раздвигания границ в цветочном дизайне, можно с уверенностью сказать, что она умеет привнести тепло осенних цветов в ваш дом.Впереди она рассказывает о покупках, цветах и делится своими советами о том, как создать свою собственную красоту в вашем доме.

Фото: предоставлено Olivee Floral
Почему осень — твой любимый цветочный сезон?
«Выбор любимого цветка подобен выбору любимого ребенка, я думаю, что лучше вообще его избегать. Поскольку мой любимый цветок так сильно зависит от времени года, я могу с уверенностью сказать, что мой любимый цветочный сезон (на Восточном побережье) — осень.Теплые, насыщенные оттенки и завораживающая текстура — это то, что я с нетерпением жду каждый год на цветочном рынке Нью-Йорка. Я люблю, когда меня окружают георгины, амаранты, хризантемы, ягодные ветки и пучки обгоревшей травянистой листвы — ощущение непревзойденное!»
Как купить осенние цветы?
«Украшая свое пространство свежими цветами в этом сезоне, не бойтесь сходить с ума и действительно используйте бесконечное разнообразие доступных элементов. В дополнение к покупкам сезонных стеблей в вашем любимом цветочном или продуктовом магазине, попробуйте посетить местный фермерский магазин. Покупайте съедобную листву и фрукты, чтобы придать глубину сервировке стола или аранжировке.Фермерские рынки определенно делают его интересным благодаря гиперсезонным и местным вариантам игры! На самом деле, я недавно разработал красивую композицию для детского душа с георгинами, перечной травой и свежим базиликом шисо от одного из моих местных фермеров».

Фото: предоставлено Olivee Floral

Фото: предоставлено Olivee Floral
Какие везикулы вам нравятся для создания осенних композиций?
«Определяя лучший сосуд для использования, начните с понимания случая, места и рассказываемой истории.Например, если мы создаем приветствие или вход для званого обеда, то это будет больше и эффектно, возможно, в богато украшенном сосуде, чтобы дополнить событие. В последнее время я получаю удовольствие от групповых ваз для бутонов вместо больших центральных предметов для званых обедов — это позволило мне моментально выделить разные цветы и действительно расширить концепцию или цветовую палитру. Использование нарезанных фруктов или свечей для улучшения опыта — это всегда бонус!»

Фото: предоставлено Olivee Floral
Каковы ваши советы по стилю и созданию уникальных интерьеров дома?
«Будь проще и доверяй своим инстинктам! У каждого свой стиль, предпочтения и вкус.Создайте что-то, на что вам нравится смотреть, и, скорее всего, это понравится и другим. Меньше сосредотачивайтесь на конечном результате и старайтесь получать удовольствие от процесса сотрудничества с природой для создания аранжировки, медитативный процесс может быть даже более полезным, чем вы ожидаете».
Везикулы растений вдохновляют методы защиты сельскохозяйственных культур
Биологи, изучающие внеклеточную РНК (exRNA) и крошечные сферические структуры, известные как экзосомы, которые передают эту генетическую информацию от клетки к клетке, обычно сосредотачиваются на млекопитающих.Однако еще в 1960-х годах ученые обнаружили, что растительные клетки также генерируют везикулы, которые выносят груз из клеточной мембраны. Но на десятилетия эти ботанические наблюдения были в значительной степени забыты.
Биолог растений Хайлинг Джин из Калифорнийского университета в Риверсайде пытается возродить поле, чтобы выяснить, как растения отправляют сообщения по сотовой связи. Она нашла доказательства того, что растения делают это отчасти для того, чтобы помешать своим грибковым врагам. Сейчас она разрабатывает фунгициды на основе exRNA.
Ее команда сконструировала растения томатов, чтобы высвобождать эксРНК, которая может подавлять гены грибка Botrytis cinerea ¹ , вызывающего болезнь серой гнили, которая ежегодно уничтожает миллионы фруктовых, овощных и цветочных растений. «Растения намного здоровее», чем те, у которых нет этой особенности, — говорит Джин. При опрыскивании грибком листья искусственных растений остаются зелеными и яркими, тогда как у их обычных собратьев появляются пятнистые листья, которые затемняются и отмирают.
В 2013 году ее группа обнаружила доказательства того, что экзосомы облегчают «перекрестные помехи» между растениями и грибами ² . Исследователи предположили, что B. cinerea высвобождает малые РНК, которые подавляют иммунные гены в модельном организме Arabidopsis thaliana . «Ее статья 2013 года стала настоящей вехой, — говорит Роджер Иннес, биолог из Университета Индианы в Блумингтоне. «Это открыло совершенно новые направления в науке о растениях».
С тех пор лаборатория
Джина показала, что клетки Arabidopsis выделяют внеклеточные везикулы, которые доставляют РНК в B.cinerea , и что эта РНК подавляет гены, важные для способности грибка заражать растения ³ . А в статье, размещенной на сервере препринтов bioRxiv ⁴, биологи сообщили, что изменение Arabidopsis таким образом, чтобы растения выделяли эксРНК, обеспечивает некоторую защиту от патогенных бактерий. Эти результаты, не прошедшие экспертную оценку, «действительно шокируют», — говорит Иннес. «У бактерий нет классического пути РНК-интерференции, поэтому он должен быть включен в какой-то новый путь, ведущий к молчанию генов у бактерий.
Джин говорит, что, хотя некоторые ученые продолжают генетически модифицировать овощи и фрукты для борьбы с губительными грибками и бактериями с помощью exRNA, длительный и дорогостоящий процесс регулирования генетически модифицированных продуктов означает, что ее команда придерживается другого подхода. Вместо этого они разрабатывают противогрибковые спреи для растений, содержащие сайленсинговую РНК.
Другие ученые черпали вдохновение в коммуникации exRNA, наблюдаемой у растений, для разработки методов лечения человека. Хуан-Ге Чжан, иммунолог из Медицинской школы Университета Луисвилля в Кентукки, пытается имитировать везикулы, перемещающие РНК, обнаруженные в растениях, путем извлечения и перепрофилирования клеточных компонентов фруктов и овощей.Он показал, что грейпфрутовый сок содержит липиды — молекулы, составляющие большую часть мембран клеток и экзосом, — которые могут быть собраны в небольшие оболочки, которые он назвал «экзосомоподобными нановекторами» ⁵ . Чжан и его коллеги нагрузили эти нановекторы противораковыми препаратами и дали их мышам с опухолями. Они обнаружили, что мыши, получавшие эту форму терапии, жили в среднем 42,5 дня, тогда как мыши, получавшие либо пустые нановекторы, либо только химиотерапевтический агент, жили 20–30 дней.Чжан говорит, что одним из преимуществ инкапсулирования лекарств таким образом является то, что продукты, из которых они получены, нетоксичны и дешевы.
Чжан получил за свою работу более 1 миллиона долларов США от Национального института здравоохранения США. В настоящее время он сотрудничает с исследователями из Онкологического центра имени Джеймса Грэма Брауна в Луисвилле в проведении клинических испытаний для проверки использования векторов растительного происхождения для доставки куркумина — компонента специи куркумы — для лечения колоректального рака. Чжан также изучает, можно ли нагружать векторы, полученные из имбиря, терапевтическими средствами на основе РНК.Его проекты вызвали некоторый коммерческий интерес. Другие группы также изучают, можно ли использовать нановезикулы растительного происхождения для доставки противораковых препаратов.
Однако некоторые ученые говорят, что структуры Чжана, перевозящие наркотики, нельзя назвать экзосомоподобными. Они отмечают, что хотя структуры примерно такого же размера, как экзосомы, и построены из молекул липидов, это не означает, что структуры ведут себя одинаково. Не только их размер делает экзосомы особенными, говорит Клотильда Тери, изучающая биологию экзосом в Институте Кюри в Париже.«Многие внеклеточные везикулы или частицы, отличные от экзосом, могут иметь одинаковый размер», — объясняет Тери, но они не обязательно ведут себя как экзосомы. Неясно, например, могут ли нановекторы передавать полезную нагрузку клеткам так же, как это делают некоторые экзосомы. И иммунная система человека может помешать нановекторам растительного происхождения, сделав их бесполезными.
Иннес, со своей стороны, ищет дополнительные доказательства того, что экзосомы действительно участвуют в передаче сигналов РНК. Круглые поперечные сечения можно увидеть возле растительных клеток под микроскопом, но Иннес хочет подтвердить, что эти формы представляют собой экзосомальные сферы, а не просто цилиндрические трубки.Для этого его группа создает ультратонкие срезы растительных клеток и делает снимок каждого среза с помощью электронного микроскопа. Затем он может в цифровом виде воссоздать трехмерную форму крошечных структур, которые, как предполагается, являются экзосомами. Он уверен, что растения посылают сигналы РНК, но хочет окончательно показать форму структур, передающих эту генетическую информацию. «Мы знаем, что это работает, — говорит Иннес. «Сейчас главный вопрос — как».
Каталожные номера
Ван, М. и др.Природа Растения 2 , 16151 (2016).
Вайберг, А. и др. Наука 342 , 118–123 (2013).
Cai, Q. и др. Наука 360 , 1126–1129 (2018).
Сингла-Растоги, М. и др. Препринт на сайте bioRxiv https://doi. org/10.1101/863902 (2019).
Ван, Q. и др. Коммуна природы . 4 , 1867 (2013).
Роксана Хамси — независимый научный журналист из Монреаля, Канада.
Секреторные везикулы — определение, структура, функции и схема
Секреторные пузырьки Определение
Везикулы представляют собой небольшие, окруженные мембраной мешочки, которые хранят и транспортируют вещества из одной клетки в другую и из одной части клетки в другую.
Небольшой сферический компартмент везикул отделен от цитозоля по крайней мере одним липидным бислоем.
Поскольку везикулы состоят из фосфолипидов, они могут отрываться и сливаться с другим мембранным материалом.
Таким образом, везикулы могут сливаться с плазматической мембраной, когда хотят выпустить свое содержимое за пределы клетки.
Однако везикулы также могут сливаться с другими органеллами, присутствующими внутри клетки, для высвобождения или поглощения веществ.
Таким образом, функция везикул в клетке зависит от типа присутствующих везикул.
Рисунок: Схема секреторных пузырьков
Введение
Содержит материалы, которые должны выводиться из клетки.
Это могут быть материалы, вредные для клетки, такие как продукты жизнедеятельности или конечные продукты реакций в клетке, и, следовательно, от них необходимо избавиться.
Однако он может даже содержать много полезных выделений, которые необходимы в разных частях тела, таких как гормоны.
Таким образом, секреторный везикул является везикулой, которая опосредует везикулярный транспорт груза, т.е. гормоны или нейротрансмиттеры – от органеллы до определенных участков клеточной мембраны , где они стыкуются и сливаются для высвобождения своего содержимого.
Было продемонстрировано, что связанные с мембраной секреторные везикулы стыкуются и сливаются с поросомами, которые представляют собой специализированные надмолекулярные структуры на клеточной мембране.
Включает синаптические везикулы и везикулы в эндокринных тканях.
Типы
а. Синаптические пузырьки
Синаптические пузырьки хранят нейротрансмиттеры. Они расположены на пресинаптических окончаниях нейронов. Когда сигнал достигает конца аксона, синаптические пузырьки сливаются с клеточной мембраной и высвобождают нейротрансмиттер.Нейротрансмиттер пересекает синаптическое соединение и связывается с рецептором на следующей клетке.
б. Везикулы в эндокринных тканях
Некоторые клетки также производят молекулы, такие как гормоны, вырабатываемые эндокринными тканями, необходимые другим клеткам. Гормоны, выделяемые эндокринными железами, также хранятся в секреторных пузырьках, откуда при необходимости высвобождаются в кровоток.
Работа синаптических пузырьков
Высвобождение белков или других молекул из секреторного пузырька чаще всего стимулируется нервным или гормональным сигналом.
Мембрана везикулы затем может сливаться с мембраной клетки-мишени и, по существу, выплескивать ее содержимое.
Затем везикула добавляет свою мембрану к мембране клетки-мишени.
Обычно это временное явление до тех пор, пока не будет создана другая везикула, когда определенные компоненты будут затем удалены из клетки.
Например, импульс нервной клетки вызывает слияние секреторных везикул с мембраной нервного окончания, где везикулы высвобождают нейротрансмиттеры в синаптическую щель (щель между нервными окончаниями).Действие представляет собой экзоцитоз: везикула и клеточная мембрана сливаются, позволяя белкам и гликопротеинам везикулы высвобождаться наружу клетки.
По мере слияния секреторных пузырьков с клеточной мембраной площадь клеточной мембраны увеличивается. Нормальный размер сохраняется за счет обратного захвата мембранных компонентов посредством эндоцитоза. Области отпочковываются от клеточной мембраны, а затем сливаются с внутренними мембранами, чтобы повлиять на рециркуляцию.
Функции секреторных пузырьков
Секреторные везикулы в регулируемом секреторном пути несут растворимые белки, пептиды или нейротрансмиттеры и активно транспортируются в выбранные субклеточные домены для внеклеточной доставки в ответ на специфический внеклеточный сигнал.
В дополнение к транспортировке секреторные везикулы могут хранить или переваривать определенные секретируемые молекулы.
Синаптические везикулы хранят нейротрансмиттеры, гормоны хранятся в секреторных везикулах для высвобождения в кровоток, а ферменты также хранятся в секреторных везикулах, которые при необходимости используются для создания клеточных стенок у некоторых растений, грибов и бактерий.
Каталожные номера
Верма, П.С., и Агравал, В.К. (2006). Клеточная биология, генетика, молекулярная биология, эволюция и экология (1-е изд.). С.Чанд и компания ООО
Альбертс, Б. (2004). Основная клеточная биология. Нью-Йорк, штат Нью-Йорк: научный паб Garland.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK9886
https://www.ck12.org/biology/Vesicles-and-Vacuoles/lesson/Vesicles-and-Vacuoles-Advanced-BIO-ADV/
https://study.com/academy/lesson/vesicles-definition-function-quiz.html
https://bio.libretexts.org/TextMaps/Introductory_and_General_Biology/Book%3A_General_Biology_(Boundless)/4%3A_Cell_Structure/4.4%3A_Эндомембранная_Система_и_Белки/4.4A%3A_Везикулы_и_Вакуоли
https://www.abcore.com/secretory-vesicles
https://courses.lumenlearning.com/boundless-biology/chapter/the-endomembrane-system-and-proteins/
https://biologywise.com/vesicle-function
https://www.sciencedirect.com/topics/neuroscience/secretory-везикулы
Секреторные везикулы — определение, структура, функции и схема
.

Пузыреплодник цветок фото: Пузыреплодник сорта фото и описание — Сад и огород

Пузыреплодник калинолистный. Посадка, размножение, уход, сорта, фото на Supersadovnik.ru

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО УХОДУ

Пузыреплодник калинолистный: посадка и уход

Декоративный кустарник

Обстоятельства времени и места

Важно правильно посадить

Теперь выращиваем

Когда нужна обрезка

Переезд на новое место

Один — это мало

Размножение черенками

Размножение отводками

На вкус и на цвет. Разнообразие сортов

Слово ландшафтных дизайнеров

Третья климатическая зона

В ожидании морозной зимы

Пузыреплодник калинолистный Диабло, описание и фото в ландшафтном дизайне

Описание растения

Использование в ландшафтном дизайне

Посадка пузыреплодника Диабло

Особенности саженцев

Подготовка участка

Как сажать

Рекомендации по уходу

Полив и подкормка

Обрезка

Подготовка к зиме

Болезни и вредители

Как размножить пузыреплодник Диабло

Выращивание из семян

Черенкование

Деление куста

Размножение отводками

Пузыреплодник – декоративный фон для садовых акцентов

Знакомьтесь – пузыреплодник

Существуют и другие разновидности этого кустарника

Как выращивать пузыреплодник?

Как размножить и посадить куст пузыреплодника?

Уход за кустарником подразумевает три главных аспекта

Пузыреплодник ред барон посадка и уход в открытом грунте

Уход за пузыреплодником

Высадка в открытом грунте

Возможные болезни

Подкормка куста

Размножение пузырепложника

Отводкой

Черенками

Деление куста

Обрезка

Санитарная

Формирующая

Уход зимой

Ред барон

Живая изгородь

Сорта

Амурский вид

Пузыреплодник ред барон — секреты декоративности

Особенности выращивания и правила ухода

Использование в ландшафтном дизайне

Посадка пузыреплодника

Размножение пузыреплодника

Размножение пузыреплодника отводками

Размножение пузыреплодника черенкованием

Уход за пузыреплодником

Обрезка

Полив

Подкормка

Сорта пузыреплодника

Пузыреплодник «Ред барон» – посадка и уход

Волдыри на коже | ДермНет NZ

Что такое пузырчатая болезнь?

Пузырчатые болезни

Острые заболевания с образованием пузырей

Острые генерализованные пузырчатые заболевания

Острые локализованные волдыри

Хронические пузырчатые заболевания

Пузырьковые генодерматозы

Хроническое приобретенное образование пузырей

Другие иммунобуллезные болезни